光学精密工程
光學精密工程
광학정밀공정
OPTICS AND PRECISION ENGINEERING
2014年
6期
1446-1453
,共8页
激光扫描共聚焦显微镜%光谱成像%荧光%分光棱镜
激光掃描共聚焦顯微鏡%光譜成像%熒光%分光稜鏡
격광소묘공취초현미경%광보성상%형광%분광릉경
laser scanning confocal microscopy%spectral imaging%fluorescence%splitting prism
在激光扫描共聚焦显微成像技术基础上引入了光谱成像技术以便区分生物组织中的不同荧光成分.采用分光棱镜对荧光进行光谱展开,在光谱谱面处设置两个可移动缝片形成出射狭缝,两个步进电机带动安装其上的两个缝片设置系统在整个工作波长(400～ 700 nm)内的光谱带宽,其最小光谱带宽优于5 nm.用488 nm激光和低压汞灯实际测量了几条谱线对应的狭缝位置并和理论值做了比较,结果显示实际狭缝位置和理论值的差值均小于0.1 mm.在全光谱和50 μm出射狭缝(对应2.5 nm光谱带宽)对老鼠肾脏组织进行了共聚焦光谱成像实验,获得了老鼠肾脏组织中DAPI标定的细胞核图像和Alexa Fluor(R) 488标定的肾脏小球曲管图像,实现了对老鼠肾脏组织不同成分的区分.实验结果表明:提出的系统能够进行共聚焦光谱成像,扩大了共聚焦显微镜的适用范围.
在激光掃描共聚焦顯微成像技術基礎上引入瞭光譜成像技術以便區分生物組織中的不同熒光成分.採用分光稜鏡對熒光進行光譜展開,在光譜譜麵處設置兩箇可移動縫片形成齣射狹縫,兩箇步進電機帶動安裝其上的兩箇縫片設置繫統在整箇工作波長(400～ 700 nm)內的光譜帶寬,其最小光譜帶寬優于5 nm.用488 nm激光和低壓汞燈實際測量瞭幾條譜線對應的狹縫位置併和理論值做瞭比較,結果顯示實際狹縫位置和理論值的差值均小于0.1 mm.在全光譜和50 μm齣射狹縫(對應2.5 nm光譜帶寬)對老鼠腎髒組織進行瞭共聚焦光譜成像實驗,穫得瞭老鼠腎髒組織中DAPI標定的細胞覈圖像和Alexa Fluor(R) 488標定的腎髒小毬麯管圖像,實現瞭對老鼠腎髒組織不同成分的區分.實驗結果錶明:提齣的繫統能夠進行共聚焦光譜成像,擴大瞭共聚焦顯微鏡的適用範圍.
재격광소묘공취초현미성상기술기출상인입료광보성상기술이편구분생물조직중적불동형광성분.채용분광릉경대형광진행광보전개,재광보보면처설치량개가이동봉편형성출사협봉,량개보진전궤대동안장기상적량개봉편설치계통재정개공작파장(400～ 700 nm)내적광보대관,기최소광보대관우우5 nm.용488 nm격광화저압홍등실제측량료궤조보선대응적협봉위치병화이론치주료비교,결과현시실제협봉위치화이론치적차치균소우0.1 mm.재전광보화50 μm출사협봉(대응2.5 nm광보대관)대로서신장조직진행료공취초광보성상실험,획득료로서신장조직중DAPI표정적세포핵도상화Alexa Fluor(R) 488표정적신장소구곡관도상,실현료대로서신장조직불동성분적구분.실험결과표명:제출적계통능구진행공취초광보성상,확대료공취초현미경적괄용범위.
