河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
5期
118-123
,共6页
赵帅举%张宇%王景冒%左勇涛%戚元成%申进文%邱立友
趙帥舉%張宇%王景冒%左勇濤%慼元成%申進文%邱立友
조수거%장우%왕경모%좌용도%척원성%신진문%구립우
糙皮侧耳%基因开关%诱导表达%绿色荧光蛋白
糙皮側耳%基因開關%誘導錶達%綠色熒光蛋白
조피측이%기인개관%유도표체%록색형광단백
Pleurotus ostreatus%gene switch%inducible expression%green fluorescent protein
为探明担子菌糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)中是否存在与构巢曲霉相似的乙醇代谢调控机制,及能否在糙皮侧耳中应用构巢曲霉alc基因开关系统调控表达外源基因,从糙皮侧耳PC15v2.0基因组数据库中电子克隆得到其假拟乙醇脱氢酶基因(alcA)及其上游序列,该基因上游1 317 bp序列中含有1个正向和2个反向调控因子AlcR蛋白的特异性结合位点序列.将构建的含有alcA基因启动子控制绿色荧光蛋白基因表达的质粒pEGFP-C1-PalcA转入糙皮侧耳天达300中,转化子在含有葡萄糖的培养基中没有绿色荧光蛋白表达,在含有乙醇的培养基中则有绿色荧光蛋白表达.综合上述,糙皮侧耳的乙醇代谢调控机制与构巢曲霉相似,仅用构巢曲霉的alcA基因启动子替代目的基因的启动子即可在糙皮侧耳中有效调控目的基因的表达.
為探明擔子菌糙皮側耳(Pleurotus ostreatus)中是否存在與構巢麯黴相似的乙醇代謝調控機製,及能否在糙皮側耳中應用構巢麯黴alc基因開關繫統調控錶達外源基因,從糙皮側耳PC15v2.0基因組數據庫中電子剋隆得到其假擬乙醇脫氫酶基因(alcA)及其上遊序列,該基因上遊1 317 bp序列中含有1箇正嚮和2箇反嚮調控因子AlcR蛋白的特異性結閤位點序列.將構建的含有alcA基因啟動子控製綠色熒光蛋白基因錶達的質粒pEGFP-C1-PalcA轉入糙皮側耳天達300中,轉化子在含有葡萄糖的培養基中沒有綠色熒光蛋白錶達,在含有乙醇的培養基中則有綠色熒光蛋白錶達.綜閤上述,糙皮側耳的乙醇代謝調控機製與構巢麯黴相似,僅用構巢麯黴的alcA基因啟動子替代目的基因的啟動子即可在糙皮側耳中有效調控目的基因的錶達.
위탐명담자균조피측이(Pleurotus ostreatus)중시부존재여구소곡매상사적을순대사조공궤제,급능부재조피측이중응용구소곡매alc기인개관계통조공표체외원기인,종조피측이PC15v2.0기인조수거고중전자극륭득도기가의을순탈경매기인(alcA)급기상유서렬,해기인상유1 317 bp서렬중함유1개정향화2개반향조공인자AlcR단백적특이성결합위점서렬.장구건적함유alcA기인계동자공제록색형광단백기인표체적질립pEGFP-C1-PalcA전입조피측이천체300중,전화자재함유포도당적배양기중몰유록색형광단백표체,재함유을순적배양기중칙유록색형광단백표체.종합상술,조피측이적을순대사조공궤제여구소곡매상사,부용구소곡매적alcA기인계동자체대목적기인적계동자즉가재조피측이중유효조공목적기인적표체.
