河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
5期
97-101
,共5页
有机磷农药%抗原%单链抗体%cDNA文库
有機燐農藥%抗原%單鏈抗體%cDNA文庫
유궤린농약%항원%단련항체%cDNA문고
organophosphorus pesticides%antigen%ScFv%cDNA library
为了获得针对不同有机磷农药的单链抗体,以人工合成的2种有机磷农药(杀螟硫磷和毒死蜱)抗原免疫小鼠,测定抗血清效价后,提取小鼠脾细胞总RNA,设计引物,通过RT-PCR扩增得到片段大小分别约为400 bp和700 bp的小鼠重链、轻链可变区基因,再利用融合PCR连接重链、轻链可变区,构建抗有机磷的单链抗体cDNA文库,片段约为1100 bp.将构建的cDNA文库与pMD18-T载体连接并转化大肠杆菌DH5α,测序分析表明,所构建的文库片段互补决定区序列变化明显,多样性好,为进一步筛选抗有机磷的高特异性、高亲和力单链抗体奠定了基础.
為瞭穫得針對不同有機燐農藥的單鏈抗體,以人工閤成的2種有機燐農藥(殺螟硫燐和毒死蜱)抗原免疫小鼠,測定抗血清效價後,提取小鼠脾細胞總RNA,設計引物,通過RT-PCR擴增得到片段大小分彆約為400 bp和700 bp的小鼠重鏈、輕鏈可變區基因,再利用融閤PCR連接重鏈、輕鏈可變區,構建抗有機燐的單鏈抗體cDNA文庫,片段約為1100 bp.將構建的cDNA文庫與pMD18-T載體連接併轉化大腸桿菌DH5α,測序分析錶明,所構建的文庫片段互補決定區序列變化明顯,多樣性好,為進一步篩選抗有機燐的高特異性、高親和力單鏈抗體奠定瞭基礎.
위료획득침대불동유궤린농약적단련항체,이인공합성적2충유궤린농약(살명류린화독사비)항원면역소서,측정항혈청효개후,제취소서비세포총RNA,설계인물,통과RT-PCR확증득도편단대소분별약위400 bp화700 bp적소서중련、경련가변구기인,재이용융합PCR련접중련、경련가변구,구건항유궤린적단련항체cDNA문고,편단약위1100 bp.장구건적cDNA문고여pMD18-T재체련접병전화대장간균DH5α,측서분석표명,소구건적문고편단호보결정구서렬변화명현,다양성호,위진일보사선항유궤린적고특이성、고친화력단련항체전정료기출.
