中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
8期
42-46
,共5页
高云航%刘佳丽%王巍%李秋菊%张福君%马红霞
高雲航%劉佳麗%王巍%李鞦菊%張福君%馬紅霞
고운항%류가려%왕외%리추국%장복군%마홍하
鸭疫里默氏菌%OmpA基因%DuIL-2基因%OmpA-DuIL-2融合基因%原核表达
鴨疫裏默氏菌%OmpA基因%DuIL-2基因%OmpA-DuIL-2融閤基因%原覈錶達
압역리묵씨균%OmpA기인%DuIL-2기인%OmpA-DuIL-2융합기인%원핵표체
以鸭疫里默氏菌吉林分离株JL-RA1OmpA基因(登录号HQ707077)和鸭DuIL-2成熟片段基因(登录号AY193713)为模板,分别设计带有linker的特异性引物,PCR扩增出序列大小为1 182bp的OmpA-linker基因和序列大小为381bp的linker-DuIL-2成熟蛋白基因.利用SOE-PCR技术,成功构建OmpA-DuIL-2融合基因,片段大小为1551 bp.将其转入大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建pET-OmpA-DuIL-2融合表达载体,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析得到分子量大小约为61 kDa的融合蛋白,经Western-blot分析该融合基因同时具OmpA和DuIL-2的反应原性.
以鴨疫裏默氏菌吉林分離株JL-RA1OmpA基因(登錄號HQ707077)和鴨DuIL-2成熟片段基因(登錄號AY193713)為模闆,分彆設計帶有linker的特異性引物,PCR擴增齣序列大小為1 182bp的OmpA-linker基因和序列大小為381bp的linker-DuIL-2成熟蛋白基因.利用SOE-PCR技術,成功構建OmpA-DuIL-2融閤基因,片段大小為1551 bp.將其轉入大腸桿菌錶達載體pET-28a中,構建pET-OmpA-DuIL-2融閤錶達載體,轉化至大腸桿菌Rosetta(DE3)中,IPTG誘導錶達,經SDS-PAGE分析得到分子量大小約為61 kDa的融閤蛋白,經Western-blot分析該融閤基因同時具OmpA和DuIL-2的反應原性.
이압역리묵씨균길림분리주JL-RA1OmpA기인(등록호HQ707077)화압DuIL-2성숙편단기인(등록호AY193713)위모판,분별설계대유linker적특이성인물,PCR확증출서렬대소위1 182bp적OmpA-linker기인화서렬대소위381bp적linker-DuIL-2성숙단백기인.이용SOE-PCR기술,성공구건OmpA-DuIL-2융합기인,편단대소위1551 bp.장기전입대장간균표체재체pET-28a중,구건pET-OmpA-DuIL-2융합표체재체,전화지대장간균Rosetta(DE3)중,IPTG유도표체,경SDS-PAGE분석득도분자량대소약위61 kDa적융합단백,경Western-blot분석해융합기인동시구OmpA화DuIL-2적반응원성.
