中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
8期
26-29
,共4页
鲜思美%杨钰%汪德生%刘嫒%尹强军%邓诗%苏刚%孔维祥
鮮思美%楊鈺%汪德生%劉嬡%尹彊軍%鄧詩%囌剛%孔維祥
선사미%양옥%왕덕생%류애%윤강군%산시%소강%공유상
鸡传染性支气管炎病毒%逆转录环介导等温扩增技术%快速检测
鷄傳染性支氣管炎病毒%逆轉錄環介導等溫擴增技術%快速檢測
계전염성지기관염병독%역전록배개도등온확증기술%쾌속검측
以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)的N基因保守区域设计4条引物,通过优化反应条件,建立了检测IBV的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测.结果显示,建立的RT-LAMP方法对IBV参考株扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克病病毒(MDV)、传染性囊病病毒(IBDV)等的扩增产物电泳后均无扩增条带.该方法最低能梭出0.19 pg的IBV cDNA模板,敏感性比常规RT-PCR方法高1 000倍.用该方法检测了6份临床疑似IB临床病料,检出率为100％(6/6),与常规RT-PCR的符合率为100％.60 min反应结束后,离心可以看到白色沉淀物,简单直观,适用于基层实验室快速准确诊断.
以鷄傳染性支氣管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)的N基因保守區域設計4條引物,通過優化反應條件,建立瞭檢測IBV的逆轉錄環介導等溫擴增技術(RT-LAMP),併進行瞭特異性試驗、敏感性試驗及臨床樣本檢測.結果顯示,建立的RT-LAMP方法對IBV參攷株擴增產物的電泳呈特徵性梯狀條帶,而新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、馬立剋病病毒(MDV)、傳染性囊病病毒(IBDV)等的擴增產物電泳後均無擴增條帶.該方法最低能梭齣0.19 pg的IBV cDNA模闆,敏感性比常規RT-PCR方法高1 000倍.用該方法檢測瞭6份臨床疑似IB臨床病料,檢齣率為100％(6/6),與常規RT-PCR的符閤率為100％.60 min反應結束後,離心可以看到白色沉澱物,簡單直觀,適用于基層實驗室快速準確診斷.
이계전염성지기관염병독(Infectious Bronchitis Virus,IBV)적N기인보수구역설계4조인물,통과우화반응조건,건립료검측IBV적역전록배개도등온확증기술(RT-LAMP),병진행료특이성시험、민감성시험급림상양본검측.결과현시,건립적RT-LAMP방법대IBV삼고주확증산물적전영정특정성제상조대,이신성역병독(NDV)、금류감병독(AIV)、마립극병병독(MDV)、전염성낭병병독(IBDV)등적확증산물전영후균무확증조대.해방법최저능사출0.19 pg적IBV cDNA모판,민감성비상규RT-PCR방법고1 000배.용해방법검측료6빈림상의사IB림상병료,검출솔위100％(6/6),여상규RT-PCR적부합솔위100％.60 min반응결속후,리심가이간도백색침정물,간단직관,괄용우기층실험실쾌속준학진단.
