基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
10期
1363-1366
,共4页
邓益斌%农乐根%梁祚仁%张梁%覃羽华%何平
鄧益斌%農樂根%樑祚仁%張樑%覃羽華%何平
산익빈%농악근%량조인%장량%담우화%하평
丙型肝炎%丙型肝炎病毒%锁核酸核酶%非编码区%基因调控
丙型肝炎%丙型肝炎病毒%鎖覈痠覈酶%非編碼區%基因調控
병형간염%병형간염병독%쇄핵산핵매%비편마구%기인조공
hepatitis C%hepatitis C virus%LNAzyme%non-coding region%gene regulation
目的 探讨针对丙肝病毒5 '非编码区内源性核糖体进入位点的锁核酸核酶(LNAzyme)对病毒基因复制与表达的特异性抑制作用.方法 设计合成能切割HCV-5'-NCR-IRES位点的DNAzyme、硫代DNAzyme和LNAzyme.实验设对照组和实验组.对照组包括空白对照组、脂质体对照组和无关LNAzyme对照组.实验组包括DNAzyme、硫代DNAzyme组和LNAzyme组.以阳离子脂质体介导转染hepG2.9706细胞,用荧光定量PCR和化学发光技术分别监测24、48和96 h细胞培养上清液中HCV RNA含量及荧光素酶基因表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法监测细胞活性.结果 加入核酶后,LNAzyme对HCV RNA复制和荧光素酶基因表达的抑制作用最强(P＜0.05),平均抑制率分别为48.02％和53.05％,且随用药时间延长,抑制率呈增高趋势,96 h后,平均抑制率分别为81.21％和84.25％.LNAzyme对细胞活性无影响.结论 LNAzyme能特异性抑制丙型肝炎病毒5 '非编码区的基因调控,且优于硫代修饰的DNAzyme.
目的 探討針對丙肝病毒5 '非編碼區內源性覈糖體進入位點的鎖覈痠覈酶(LNAzyme)對病毒基因複製與錶達的特異性抑製作用.方法 設計閤成能切割HCV-5'-NCR-IRES位點的DNAzyme、硫代DNAzyme和LNAzyme.實驗設對照組和實驗組.對照組包括空白對照組、脂質體對照組和無關LNAzyme對照組.實驗組包括DNAzyme、硫代DNAzyme組和LNAzyme組.以暘離子脂質體介導轉染hepG2.9706細胞,用熒光定量PCR和化學髮光技術分彆鑑測24、48和96 h細胞培養上清液中HCV RNA含量及熒光素酶基因錶達;四甲基偶氮唑藍(MTT)法鑑測細胞活性.結果 加入覈酶後,LNAzyme對HCV RNA複製和熒光素酶基因錶達的抑製作用最彊(P＜0.05),平均抑製率分彆為48.02％和53.05％,且隨用藥時間延長,抑製率呈增高趨勢,96 h後,平均抑製率分彆為81.21％和84.25％.LNAzyme對細胞活性無影響.結論 LNAzyme能特異性抑製丙型肝炎病毒5 '非編碼區的基因調控,且優于硫代脩飾的DNAzyme.
목적 탐토침대병간병독5 '비편마구내원성핵당체진입위점적쇄핵산핵매(LNAzyme)대병독기인복제여표체적특이성억제작용.방법 설계합성능절할HCV-5'-NCR-IRES위점적DNAzyme、류대DNAzyme화LNAzyme.실험설대조조화실험조.대조조포괄공백대조조、지질체대조조화무관LNAzyme대조조.실험조포괄DNAzyme、류대DNAzyme조화LNAzyme조.이양리자지질체개도전염hepG2.9706세포,용형광정량PCR화화학발광기술분별감측24、48화96 h세포배양상청액중HCV RNA함량급형광소매기인표체;사갑기우담서람(MTT)법감측세포활성.결과 가입핵매후,LNAzyme대HCV RNA복제화형광소매기인표체적억제작용최강(P＜0.05),평균억제솔분별위48.02％화53.05％,차수용약시간연장,억제솔정증고추세,96 h후,평균억제솔분별위81.21％화84.25％.LNAzyme대세포활성무영향.결론 LNAzyme능특이성억제병형간염병독5 '비편마구적기인조공,차우우류대수식적DNAzyme.
