基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
6期
819-823
,共5页
张靖%吴朝%朱丽媛%阴彬%侯琳%彭小忠
張靖%吳朝%硃麗媛%陰彬%侯琳%彭小忠
장정%오조%주려원%음빈%후림%팽소충
小鼠大脑发育%Lmo4%自然反义转录物%原位杂交%转录后调控
小鼠大腦髮育%Lmo4%自然反義轉錄物%原位雜交%轉錄後調控
소서대뇌발육%Lmo4%자연반의전록물%원위잡교%전록후조공
mouse brain development%Lmo4%natural antisense transcript%in situ hybridization%post-transcriptional regulation
目的 探索小鼠神经系统重要编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对该编码基因的表达调控功能.方法 1)使用cDNA末端快速扩增(RACE)与RT-PCR技术,验证Lmo4as是否具有多聚腺苷酸(polyA)尾,克隆Lmo4as的全长序列;2)使用实时定量PCR和原位杂交技术确定Lmo4as及相应编码基冈的时空表达谱;3)使用荧光素酶报告基因实验在体外验证Lmo4as对Lmo4是否具有调控作用.结果 1)Lmo4as是一个具有多聚腺苷酸(polyA)尾的非编码RNA转录本,获得其RNA全长信息;2)Lmo4as与相应编码基因转录Lmo4的丰度在时间上具有协同性,而在空间表达上具有明显不同的分布;3)Lmo4as对Lmo4在转录后水平具有负性调节作用,另外miR-124也能够抑制Lmo4的表达.结论 编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对其转录后水平的负性调节与 microRNA的调节共同发挥作用.
目的 探索小鼠神經繫統重要編碼基因Lmo4基因座位上自然反義轉錄產物Lmo4as對該編碼基因的錶達調控功能.方法 1)使用cDNA末耑快速擴增(RACE)與RT-PCR技術,驗證Lmo4as是否具有多聚腺苷痠(polyA)尾,剋隆Lmo4as的全長序列;2)使用實時定量PCR和原位雜交技術確定Lmo4as及相應編碼基岡的時空錶達譜;3)使用熒光素酶報告基因實驗在體外驗證Lmo4as對Lmo4是否具有調控作用.結果 1)Lmo4as是一箇具有多聚腺苷痠(polyA)尾的非編碼RNA轉錄本,穫得其RNA全長信息;2)Lmo4as與相應編碼基因轉錄Lmo4的豐度在時間上具有協同性,而在空間錶達上具有明顯不同的分佈;3)Lmo4as對Lmo4在轉錄後水平具有負性調節作用,另外miR-124也能夠抑製Lmo4的錶達.結論 編碼基因Lmo4基因座位上自然反義轉錄產物Lmo4as對其轉錄後水平的負性調節與 microRNA的調節共同髮揮作用.
목적 탐색소서신경계통중요편마기인Lmo4기인좌위상자연반의전록산물Lmo4as대해편마기인적표체조공공능.방법 1)사용cDNA말단쾌속확증(RACE)여RT-PCR기술,험증Lmo4as시부구유다취선감산(polyA)미,극륭Lmo4as적전장서렬;2)사용실시정량PCR화원위잡교기술학정Lmo4as급상응편마기강적시공표체보;3)사용형광소매보고기인실험재체외험증Lmo4as대Lmo4시부구유조공작용.결과 1)Lmo4as시일개구유다취선감산(polyA)미적비편마RNA전록본,획득기RNA전장신식;2)Lmo4as여상응편마기인전록Lmo4적봉도재시간상구유협동성,이재공간표체상구유명현불동적분포;3)Lmo4as대Lmo4재전록후수평구유부성조절작용,령외miR-124야능구억제Lmo4적표체.결론 편마기인Lmo4기인좌위상자연반의전록산물Lmo4as대기전록후수평적부성조절여 microRNA적조절공동발휘작용.
