基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
6期
802-809
,共8页
孙昊%刘玉琴%卞晓翠%杨振丽%赵晓梅
孫昊%劉玉琴%卞曉翠%楊振麗%趙曉梅
손호%류옥금%변효취%양진려%조효매
组织特异因子%细胞%组织起源
組織特異因子%細胞%組織起源
조직특이인자%세포%조직기원
tissue-specific factors%cell%tissue origin
目的 建立一种有效简便经济的检测方法,用于鉴定培养细胞的组织来源,对新鲜取材细胞归类,检测细胞组织来源.方法 根据文献报道与NCBI数据库,设计17对组织特异性相关引物,分别针对16个常见的人类组织特异性因子的mRNA保守序列,培养细胞,提取mRNA,反转录为cDNA,以此为模板进行PCR,琼脂糖凝胶电泳分析;对这些引物进行特异性和敏感性的筛选;其中8对引物可用于判断人类组织特异性,以双肓实验对此方法进行验证,用于鉴定人类细胞的组织来源.结果 17对组织特异性相关引物中,特异性分子ALB、AFP、SYN、CDH16、SFTPB、LCA、FLT和MUL2的对应引物可有效应用于鉴定细胞是否源自肝、肾、神经、肺、造血、内皮和分泌组织;特异性因子PSA对应引物可广泛在人类各组织细胞中扩增出条带;鉴定其他组织的引物有待进一步研究完善优化.结论 应用反转录聚合酶链式反应扩增编码组织特异性分子mRNA的保守序列可以准确鉴定待检测细胞的组织来源.本研究为鉴定常见细胞的组织来源提供新方法.
目的 建立一種有效簡便經濟的檢測方法,用于鑒定培養細胞的組織來源,對新鮮取材細胞歸類,檢測細胞組織來源.方法 根據文獻報道與NCBI數據庫,設計17對組織特異性相關引物,分彆針對16箇常見的人類組織特異性因子的mRNA保守序列,培養細胞,提取mRNA,反轉錄為cDNA,以此為模闆進行PCR,瓊脂糖凝膠電泳分析;對這些引物進行特異性和敏感性的篩選;其中8對引物可用于判斷人類組織特異性,以雙肓實驗對此方法進行驗證,用于鑒定人類細胞的組織來源.結果 17對組織特異性相關引物中,特異性分子ALB、AFP、SYN、CDH16、SFTPB、LCA、FLT和MUL2的對應引物可有效應用于鑒定細胞是否源自肝、腎、神經、肺、造血、內皮和分泌組織;特異性因子PSA對應引物可廣汎在人類各組織細胞中擴增齣條帶;鑒定其他組織的引物有待進一步研究完善優化.結論 應用反轉錄聚閤酶鏈式反應擴增編碼組織特異性分子mRNA的保守序列可以準確鑒定待檢測細胞的組織來源.本研究為鑒定常見細胞的組織來源提供新方法.
목적 건립일충유효간편경제적검측방법,용우감정배양세포적조직래원,대신선취재세포귀류,검측세포조직래원.방법 근거문헌보도여NCBI수거고,설계17대조직특이성상관인물,분별침대16개상견적인류조직특이성인자적mRNA보수서렬,배양세포,제취mRNA,반전록위cDNA,이차위모판진행PCR,경지당응효전영분석;대저사인물진행특이성화민감성적사선;기중8대인물가용우판단인류조직특이성,이쌍황실험대차방법진행험증,용우감정인류세포적조직래원.결과 17대조직특이성상관인물중,특이성분자ALB、AFP、SYN、CDH16、SFTPB、LCA、FLT화MUL2적대응인물가유효응용우감정세포시부원자간、신、신경、폐、조혈、내피화분비조직;특이성인자PSA대응인물가엄범재인류각조직세포중확증출조대;감정기타조직적인물유대진일보연구완선우화.결론 응용반전록취합매련식반응확증편마조직특이성분자mRNA적보수서렬가이준학감정대검측세포적조직래원.본연구위감정상견세포적조직래원제공신방법.
