基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
6期
776-781
,共6页
RNA干扰%多聚胞嘧啶结合蛋白2%P53%细胞增殖%细胞凋亡
RNA榦擾%多聚胞嘧啶結閤蛋白2%P53%細胞增殖%細胞凋亡
RNA간우%다취포밀정결합단백2%P53%세포증식%세포조망
RNA interference%poly(C) binding protein 2%P53%cell proliferation%cell apoptosis
目的 探索多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)表达下调对相关基因和胶质瘤细胞增殖的影响.方法 3株神经胶质瘤细胞系(T98G、U87MG和U251)各分为2组,分别转入特异性靶向PCBP2基因的小干扰RNA (siRNA)和对照siRNA,用Western blot法检测siRNA对PCBP2蛋白的抑制效果及对P53蛋白和它的两个靶基因PUMA和BAX的表达影响,同时检测P53共调节因子FHL2和同家族成员FHL1表达变化.用生物素pull-down分析PCBP2是否和FHL家族成员mRNA结合.用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖能力,Hoechst染色观察细胞凋亡率.结果 PCBP2 siRNA转染这3株细胞后使PCBP2蛋白表达水平明显下调(P＜0.05);增加P53及它的靶基因PUMA和BAX的蛋白表达(P＜0.05);抑制FHL2蛋白(P＜0.05),但并不结合其mRNA的3'非编码区(3'UTR);BrdU阳性细胞减少(P＜0.05);Hoechst染色阳性细胞增多(P＜0.05).结论 抑制PCBP2表达可以增强胶质瘤细胞中P53通路活性,并减弱细胞增殖能力,诱导细胞凋亡.
目的 探索多聚胞嘧啶結閤蛋白2(PCBP2)錶達下調對相關基因和膠質瘤細胞增殖的影響.方法 3株神經膠質瘤細胞繫(T98G、U87MG和U251)各分為2組,分彆轉入特異性靶嚮PCBP2基因的小榦擾RNA (siRNA)和對照siRNA,用Western blot法檢測siRNA對PCBP2蛋白的抑製效果及對P53蛋白和它的兩箇靶基因PUMA和BAX的錶達影響,同時檢測P53共調節因子FHL2和同傢族成員FHL1錶達變化.用生物素pull-down分析PCBP2是否和FHL傢族成員mRNA結閤.用5-溴脫氧尿嘧啶覈苷(BrdU)摻入法檢測細胞增殖能力,Hoechst染色觀察細胞凋亡率.結果 PCBP2 siRNA轉染這3株細胞後使PCBP2蛋白錶達水平明顯下調(P＜0.05);增加P53及它的靶基因PUMA和BAX的蛋白錶達(P＜0.05);抑製FHL2蛋白(P＜0.05),但併不結閤其mRNA的3'非編碼區(3'UTR);BrdU暘性細胞減少(P＜0.05);Hoechst染色暘性細胞增多(P＜0.05).結論 抑製PCBP2錶達可以增彊膠質瘤細胞中P53通路活性,併減弱細胞增殖能力,誘導細胞凋亡.
목적 탐색다취포밀정결합단백2(PCBP2)표체하조대상관기인화효질류세포증식적영향.방법 3주신경효질류세포계(T98G、U87MG화U251)각분위2조,분별전입특이성파향PCBP2기인적소간우RNA (siRNA)화대조siRNA,용Western blot법검측siRNA대PCBP2단백적억제효과급대P53단백화타적량개파기인PUMA화BAX적표체영향,동시검측P53공조절인자FHL2화동가족성원FHL1표체변화.용생물소pull-down분석PCBP2시부화FHL가족성원mRNA결합.용5-추탈양뇨밀정핵감(BrdU)참입법검측세포증식능력,Hoechst염색관찰세포조망솔.결과 PCBP2 siRNA전염저3주세포후사PCBP2단백표체수평명현하조(P＜0.05);증가P53급타적파기인PUMA화BAX적단백표체(P＜0.05);억제FHL2단백(P＜0.05),단병불결합기mRNA적3'비편마구(3'UTR);BrdU양성세포감소(P＜0.05);Hoechst염색양성세포증다(P＜0.05).결론 억제PCBP2표체가이증강효질류세포중P53통로활성,병감약세포증식능력,유도세포조망.
