基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
6期
729-733
,共5页
王柏琦%陈艳华%蒋丽琴%程爱兰
王柏琦%陳豔華%蔣麗琴%程愛蘭
왕백기%진염화%장려금%정애란
鼻咽癌%伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)%甲基化%姜黄素
鼻嚥癌%伴有kazal域的富含半胱氨痠的逆轉誘導蛋白(RECK)%甲基化%薑黃素
비인암%반유kazal역적부함반광안산적역전유도단백(RECK)%갑기화%강황소
nasopharyngeal carcinoma%reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs (RECK)%methylation%curcumin
目的 探讨姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因表达及甲基化的影响,并探讨可能的机制.方法 体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1、10和30 μmol/L姜黄素处理后,用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)的蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化,同时用MTT检测CNE-1细胞增殖,EMSA法检测核转录因子Sp1的DNA结合活性.结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1～30 μmolL姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达(P＜0.05).30 μmol/L姜黄素处理CNE-1细胞后,RECK启动子甲基化水平降低至31％ (P ＜0.05),全基因组甲基化水平降低39％ (P ＜0.05),细胞系的甲基化活性减少了72％ (P ＜0.05).同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中DNMT1的蛋白和mRNA表达(P＜0.05),也能减低CNE-1细胞的存活率(P＜0.05).EMSA结果显示,姜黄素处理后,CNE-1细胞中Sp1的DNA活性显著降低.结论 姜黄素可能通过上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而抑制CNE-1细胞生长.
目的 探討薑黃素對鼻嚥癌細胞RECK基因錶達及甲基化的影響,併探討可能的機製.方法 體外培養鼻嚥癌細胞繫CNE-1,用1、10和30 μmol/L薑黃素處理後,用Western blot和實時定量PCR分彆檢測RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)的蛋白和mRNA錶達;高效液相色譜-電噴霧質譜檢測RECK甲基化,同時用MTT檢測CNE-1細胞增殖,EMSA法檢測覈轉錄因子Sp1的DNA結閤活性.結果 CNE-1細胞未刺激時RECK錶達水平較低,而經1～30 μmolL薑黃素處理後,能顯著增彊RECK蛋白和mRNA的錶達(P＜0.05).30 μmol/L薑黃素處理CNE-1細胞後,RECK啟動子甲基化水平降低至31％ (P ＜0.05),全基因組甲基化水平降低39％ (P ＜0.05),細胞繫的甲基化活性減少瞭72％ (P ＜0.05).同時,薑黃素能顯著降低CNE-1細胞中DNMT1的蛋白和mRNA錶達(P＜0.05),也能減低CNE-1細胞的存活率(P＜0.05).EMSA結果顯示,薑黃素處理後,CNE-1細胞中Sp1的DNA活性顯著降低.結論 薑黃素可能通過上調RECK基因錶達,降低細胞內甲基化水平,從而抑製CNE-1細胞生長.
목적 탐토강황소대비인암세포RECK기인표체급갑기화적영향,병탐토가능적궤제.방법 체외배양비인암세포계CNE-1,용1、10화30 μmol/L강황소처리후,용Western blot화실시정량PCR분별검측RECK기인이급DNA갑기화매1(DNMT1)적단백화mRNA표체;고효액상색보-전분무질보검측RECK갑기화,동시용MTT검측CNE-1세포증식,EMSA법검측핵전록인자Sp1적DNA결합활성.결과 CNE-1세포미자격시RECK표체수평교저,이경1～30 μmolL강황소처리후,능현저증강RECK단백화mRNA적표체(P＜0.05).30 μmol/L강황소처리CNE-1세포후,RECK계동자갑기화수평강저지31％ (P ＜0.05),전기인조갑기화수평강저39％ (P ＜0.05),세포계적갑기화활성감소료72％ (P ＜0.05).동시,강황소능현저강저CNE-1세포중DNMT1적단백화mRNA표체(P＜0.05),야능감저CNE-1세포적존활솔(P＜0.05).EMSA결과현시,강황소처리후,CNE-1세포중Sp1적DNA활성현저강저.결론 강황소가능통과상조RECK기인표체,강저세포내갑기화수평,종이억제CNE-1세포생장.
