复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2014年
3期
395-399
,共5页
廖亚平%张鼎%孙梓桉%孟芳梅%梁玉华
廖亞平%張鼎%孫梓桉%孟芳梅%樑玉華
료아평%장정%손재안%맹방매%량옥화
胞质分裂阻断微核(CBMN)法%细胞松弛素(cyt-B)%全血培养法%微核(MN)
胞質分裂阻斷微覈(CBMN)法%細胞鬆弛素(cyt-B)%全血培養法%微覈(MN)
포질분렬조단미핵(CBMN)법%세포송이소(cyt-B)%전혈배양법%미핵(MN)
cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay%cytochalasin B (cyt-B)%whole blood cultures%micronuclei (MN)
目的 改良全血培养胞质分裂阻断微核(cytokinesis-bloek micronucleus,CBMN)实验制片法及探讨细胞松弛素B(cytochalasin B,cyt-B)的最佳浓度.方法 依据常规微核试验制片法,在低渗液的温度、固定液比例和操作手法等方面改进实验方法;设置不同浓度cyt-B组(4、5、6、7 μg/mL),常规外周血淋巴培养至44 h加入cyt-B,继续培养至68 h或72 h,收获细胞.按人类微核计划(HUMN Project)中的识别标准识别双核、多核细胞和微核(micronuclei,MN),确定cyt-B最适浓度,并分析cyt-B对自发微核率的影响.结果 改良法所获的双核淋巴细胞的胞膜完整,边界清晰,微核易于辨认.培养72 h后,cyt-B浓度≥5μg /mL时,双核细胞比例较4 μg/mL组显著增加(P=0.001);cyt-B浓度≥6μg/mL时,三核以上细胞比例显著增加(P =0.01).培养68 h后,cyt-B浓度为6μg/mL时,双核细胞比例较高(58.4％).各浓度组淋巴细胞自发微核率的差异无统计学意义(P=0.32).结论 改良法选用cyt-B浓度为5μg/mL、培养72 h或cyt-B浓度为6μg/mL、培养68 h时收获的细胞,可获得大量双核细胞,且胞膜完整,染色清晰;cyt-B对淋巴细胞自发微核率无显著影响.
目的 改良全血培養胞質分裂阻斷微覈(cytokinesis-bloek micronucleus,CBMN)實驗製片法及探討細胞鬆弛素B(cytochalasin B,cyt-B)的最佳濃度.方法 依據常規微覈試驗製片法,在低滲液的溫度、固定液比例和操作手法等方麵改進實驗方法;設置不同濃度cyt-B組(4、5、6、7 μg/mL),常規外週血淋巴培養至44 h加入cyt-B,繼續培養至68 h或72 h,收穫細胞.按人類微覈計劃(HUMN Project)中的識彆標準識彆雙覈、多覈細胞和微覈(micronuclei,MN),確定cyt-B最適濃度,併分析cyt-B對自髮微覈率的影響.結果 改良法所穫的雙覈淋巴細胞的胞膜完整,邊界清晰,微覈易于辨認.培養72 h後,cyt-B濃度≥5μg /mL時,雙覈細胞比例較4 μg/mL組顯著增加(P=0.001);cyt-B濃度≥6μg/mL時,三覈以上細胞比例顯著增加(P =0.01).培養68 h後,cyt-B濃度為6μg/mL時,雙覈細胞比例較高(58.4％).各濃度組淋巴細胞自髮微覈率的差異無統計學意義(P=0.32).結論 改良法選用cyt-B濃度為5μg/mL、培養72 h或cyt-B濃度為6μg/mL、培養68 h時收穫的細胞,可穫得大量雙覈細胞,且胞膜完整,染色清晰;cyt-B對淋巴細胞自髮微覈率無顯著影響.
목적 개량전혈배양포질분렬조단미핵(cytokinesis-bloek micronucleus,CBMN)실험제편법급탐토세포송이소B(cytochalasin B,cyt-B)적최가농도.방법 의거상규미핵시험제편법,재저삼액적온도、고정액비례화조작수법등방면개진실험방법;설치불동농도cyt-B조(4、5、6、7 μg/mL),상규외주혈림파배양지44 h가입cyt-B,계속배양지68 h혹72 h,수획세포.안인류미핵계화(HUMN Project)중적식별표준식별쌍핵、다핵세포화미핵(micronuclei,MN),학정cyt-B최괄농도,병분석cyt-B대자발미핵솔적영향.결과 개량법소획적쌍핵림파세포적포막완정,변계청석,미핵역우변인.배양72 h후,cyt-B농도≥5μg /mL시,쌍핵세포비례교4 μg/mL조현저증가(P=0.001);cyt-B농도≥6μg/mL시,삼핵이상세포비례현저증가(P =0.01).배양68 h후,cyt-B농도위6μg/mL시,쌍핵세포비례교고(58.4％).각농도조림파세포자발미핵솔적차이무통계학의의(P=0.32).결론 개량법선용cyt-B농도위5μg/mL、배양72 h혹cyt-B농도위6μg/mL、배양68 h시수획적세포,가획득대량쌍핵세포,차포막완정,염색청석;cyt-B대림파세포자발미핵솔무현저영향.
