复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2014年
3期
384-388
,共5页
乔可%王晴岚%李紫煜%牛辰
喬可%王晴嵐%李紫煜%牛辰
교가%왕청람%리자욱%우신
海分枝杆菌(Mm)%巨噬细胞%活细胞成像%细菌增殖%感染复数(MOI)
海分枝桿菌(Mm)%巨噬細胞%活細胞成像%細菌增殖%感染複數(MOI)
해분지간균(Mm)%거서세포%활세포성상%세균증식%감염복수(MOI)
Mycobacterium marinum (Mm)%macrophage%live cell imaging%mycobacteria proliferation%multiplicity of infection (MOI)
目的 利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程.方法 用经GFP标记的野生型海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,Mm)分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数(multiplicity of infection,MOI)对胞内菌增殖动态的追踪效果.结果 使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化.γ-干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用.当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程.结论 通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究.
目的 利用綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)標記和活細胞顯微成像的方法,實時追蹤分枝桿菌在巨噬細胞內的增殖過程.方法 用經GFP標記的野生型海分枝桿菌(Mycobacterium marinum,Mm)分彆侵染未激活和γ-榦擾素激活的巨噬細胞,使用活細胞顯微成像繫統連續記錄胞內分枝桿菌的增殖動態,同時優化不同細胞接種濃度和感染複數(multiplicity of infection,MOI)對胞內菌增殖動態的追蹤效果.結果 使用GFP標記和活細胞成像的方法可以實時追蹤胞內分枝桿菌的增殖過程和形態學變化.γ-榦擾素對Mm在巨噬細胞中的增殖有抑製作用.噹接種巨噬細胞濃度為1×105/孔,MOI為1時,可直觀清晰地分析實時追蹤圖像中胞內菌的增殖過程.結論 通過活細胞成像技術分析熒光蛋白標記的分枝桿菌,可實時追蹤巨噬細胞內分枝桿菌增殖過程和形態學變化,是一種體外分析胞內分枝桿菌增殖的理想方法,可應用于其他相關病原菌和宿主相互作用及影響因素的研究.
목적 이용록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)표기화활세포현미성상적방법,실시추종분지간균재거서세포내적증식과정.방법 용경GFP표기적야생형해분지간균(Mycobacterium marinum,Mm)분별침염미격활화γ-간우소격활적거서세포,사용활세포현미성상계통련속기록포내분지간균적증식동태,동시우화불동세포접충농도화감염복수(multiplicity of infection,MOI)대포내균증식동태적추종효과.결과 사용GFP표기화활세포성상적방법가이실시추종포내분지간균적증식과정화형태학변화.γ-간우소대Mm재거서세포중적증식유억제작용.당접충거서세포농도위1×105/공,MOI위1시,가직관청석지분석실시추종도상중포내균적증식과정.결론 통과활세포성상기술분석형광단백표기적분지간균,가실시추종거서세포내분지간균증식과정화형태학변화,시일충체외분석포내분지간균증식적이상방법,가응용우기타상관병원균화숙주상호작용급영향인소적연구.
