科学中国人
科學中國人
과학중국인
SCIENTIFIC CHINESE
2014年
9期
16-16,35
,共2页
氧化硫硫杆菌%质粒%酶切图谱%克隆
氧化硫硫桿菌%質粒%酶切圖譜%剋隆
양화류류간균%질립%매절도보%극륭
目的：改造氧化硫硫杆菌的质粒 pTt12,建立一个既能在氧化硫硫杆菌中复制又能在大肠杆菌中复制的穿梭质粒,为用基因工程改造在细菌浸矿、环境保护中使用的工业菌株提供实验根据.方法首先进行氧化硫硫杆菌(Thiobacillusthiooxidans-1)的pTt12质粒的限制性内切酶 XhoⅠ、PvuⅡ、BglⅡ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ和 SalⅠ酶切分析,构建质粒 pTt12的物理图谱.通过 pBR325质粒(E．coli)的 SalⅠ切点和 pTt12质粒的 XhoⅠ切点进行了体外重塑,构成了一个分子量为12．71Md 的杂合质粒pSD125,并成功地转入了大肠杆菌 HB101菌种.结论经分子量测定、酶切分析、转化试验证明,pSD125质粒确系 pBR325和 pTt12重组而成,且能在大肠杆菌 HB101和Thiobacillusthiooxidans-1中转化克隆.
目的：改造氧化硫硫桿菌的質粒 pTt12,建立一箇既能在氧化硫硫桿菌中複製又能在大腸桿菌中複製的穿梭質粒,為用基因工程改造在細菌浸礦、環境保護中使用的工業菌株提供實驗根據.方法首先進行氧化硫硫桿菌(Thiobacillusthiooxidans-1)的pTt12質粒的限製性內切酶 XhoⅠ、PvuⅡ、BglⅡ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ和 SalⅠ酶切分析,構建質粒 pTt12的物理圖譜.通過 pBR325質粒(E．coli)的 SalⅠ切點和 pTt12質粒的 XhoⅠ切點進行瞭體外重塑,構成瞭一箇分子量為12．71Md 的雜閤質粒pSD125,併成功地轉入瞭大腸桿菌 HB101菌種.結論經分子量測定、酶切分析、轉化試驗證明,pSD125質粒確繫 pBR325和 pTt12重組而成,且能在大腸桿菌 HB101和Thiobacillusthiooxidans-1中轉化剋隆.
목적：개조양화류류간균적질립 pTt12,건립일개기능재양화류류간균중복제우능재대장간균중복제적천사질립,위용기인공정개조재세균침광、배경보호중사용적공업균주제공실험근거.방법수선진행양화류류간균(Thiobacillusthiooxidans-1)적pTt12질립적한제성내절매 XhoⅠ、PvuⅡ、BglⅡ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ화 SalⅠ매절분석,구건질립 pTt12적물리도보.통과 pBR325질립(E．coli)적 SalⅠ절점화 pTt12질립적 XhoⅠ절점진행료체외중소,구성료일개분자량위12．71Md 적잡합질립pSD125,병성공지전입료대장간균 HB101균충.결론경분자량측정、매절분석、전화시험증명,pSD125질립학계 pBR325화 pTt12중조이성,차능재대장간균 HB101화Thiobacillusthiooxidans-1중전화극륭.
