中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2014年
5期
713-717
,共5页
α-硫辛酸%吡咯烷二硫代氨基甲酸%Hep-2 细胞%细胞增殖
α-硫辛痠%吡咯烷二硫代氨基甲痠%Hep-2 細胞%細胞增殖
α-류신산%필각완이류대안기갑산%Hep-2 세포%세포증식
α-lipoic acid%pyrrolidine dithiocarbamic acid%Hep-2 cells%cell proliferation
目的：探讨α-硫辛酸（α-LA）对吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）抑制 Hep-2细胞增殖的影响。方法体外培养人喉癌细胞系 Hep-2细胞，加入α-LA、PDTC 或α-LA 联合 PDTC 作用12，24和48 h 后，用 WST-1法和软琼脂集落形成法检测细胞增殖，Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果α-LA 5~500μmol·L-1对 Hep-2细胞增殖无抑制作用，PDTC 5~50μmol·L-1能明显抑制Hep-2细胞增殖（P﹤0.05，P﹤0.01），PDTC 5μmol·L-1联合α-LA 5，10和20μmol·L-1对 Hep-2细胞增殖的抑制率明显高于对照组（P﹤0.01）和 PDTC 单独处理组（P﹤0.05）。PDTC 5μmol·L-1与α-LA 5μmol·L-1联合用药，在12~48 h 内对 Hep-2细胞增殖的抑制率呈时间依赖性（r ＝0.987，P﹤0.05），24 h 后软琼脂细胞集落形成数与 PDTC 单独处理（P﹤0.05）和α-LA 单独处理组相比明显减少（P﹤0.01）。Hoechst33258染色和流式细胞仪检测结果表明，与 PDTC 和α-LA 单独处理组比较，PDTC 5μmol·L-1与α-LA 5μmol·L-1联合用药24 h 凋亡细胞增加，G2/ M 期细胞百分率增加（P﹤0.05）。结论α-LA 可增强 PDTC 对 Hep-2细胞增殖的抑制作用并诱导 Hep-2细胞凋亡。
目的：探討α-硫辛痠（α-LA）對吡咯烷二硫代氨基甲痠（PDTC）抑製 Hep-2細胞增殖的影響。方法體外培養人喉癌細胞繫 Hep-2細胞，加入α-LA、PDTC 或α-LA 聯閤 PDTC 作用12，24和48 h 後，用 WST-1法和軟瓊脂集落形成法檢測細胞增殖，Hoechst33258染色法和流式細胞儀檢測細胞凋亡和細胞週期。結果α-LA 5~500μmol·L-1對 Hep-2細胞增殖無抑製作用，PDTC 5~50μmol·L-1能明顯抑製Hep-2細胞增殖（P﹤0.05，P﹤0.01），PDTC 5μmol·L-1聯閤α-LA 5，10和20μmol·L-1對 Hep-2細胞增殖的抑製率明顯高于對照組（P﹤0.01）和 PDTC 單獨處理組（P﹤0.05）。PDTC 5μmol·L-1與α-LA 5μmol·L-1聯閤用藥，在12~48 h 內對 Hep-2細胞增殖的抑製率呈時間依賴性（r ＝0.987，P﹤0.05），24 h 後軟瓊脂細胞集落形成數與 PDTC 單獨處理（P﹤0.05）和α-LA 單獨處理組相比明顯減少（P﹤0.01）。Hoechst33258染色和流式細胞儀檢測結果錶明，與 PDTC 和α-LA 單獨處理組比較，PDTC 5μmol·L-1與α-LA 5μmol·L-1聯閤用藥24 h 凋亡細胞增加，G2/ M 期細胞百分率增加（P﹤0.05）。結論α-LA 可增彊 PDTC 對 Hep-2細胞增殖的抑製作用併誘導 Hep-2細胞凋亡。
목적：탐토α-류신산（α-LA）대필각완이류대안기갑산（PDTC）억제 Hep-2세포증식적영향。방법체외배양인후암세포계 Hep-2세포，가입α-LA、PDTC 혹α-LA 연합 PDTC 작용12，24화48 h 후，용 WST-1법화연경지집락형성법검측세포증식，Hoechst33258염색법화류식세포의검측세포조망화세포주기。결과α-LA 5~500μmol·L-1대 Hep-2세포증식무억제작용，PDTC 5~50μmol·L-1능명현억제Hep-2세포증식（P﹤0.05，P﹤0.01），PDTC 5μmol·L-1연합α-LA 5，10화20μmol·L-1대 Hep-2세포증식적억제솔명현고우대조조（P﹤0.01）화 PDTC 단독처리조（P﹤0.05）。PDTC 5μmol·L-1여α-LA 5μmol·L-1연합용약，재12~48 h 내대 Hep-2세포증식적억제솔정시간의뢰성（r ＝0.987，P﹤0.05），24 h 후연경지세포집락형성수여 PDTC 단독처리（P﹤0.05）화α-LA 단독처리조상비명현감소（P﹤0.01）。Hoechst33258염색화류식세포의검측결과표명，여 PDTC 화α-LA 단독처리조비교，PDTC 5μmol·L-1여α-LA 5μmol·L-1연합용약24 h 조망세포증가，G2/ M 기세포백분솔증가（P﹤0.05）。결론α-LA 가증강 PDTC 대 Hep-2세포증식적억제작용병유도 Hep-2세포조망。
OBJECTIVE To investigate whether α-lipoic acid(α-LA)can promote the anti-prolifera-tion effect of pyrrolidine dithiocarbamic acid(PDTC)in Hep-2 cells. METHODS The laryngeal carcino-ma Hep-2 cells were cultured with α-LA,PDTC or α-LA+PDTC respectively for 12,24 and 48 h. The proliferation of Hep-2 cells was detected by WST-1 assay and soft agar colony formation while apoptosis and cell cycle were analyzed by Hoechst33258 staining and flow cytometry. RESULTS α-LA 5 -500 μmol·L-1 could not inhibit Hep-2 cell proliferation,but PDTC 5 -50 μmol·L-1 could( P ﹤0.05,P ﹤0.01). The cell proliferation inhibitory rate of PDTC 5 μmol·L-1 combined with α-LA 5,10 and 20 μmol·L-1 groups was much higher than in control group(P﹤0.01)and PDTC alone group(P﹤0.05). When α-LA 5 μmol·L-1 was used in combination with PDTC 5 μmol·L-1 for 12-48 h,the cell proliferation was inhibited in a time-dependent manner(r=0.987,P﹤0.05). When the cells were treated for 24 h,the number of soft agar colony formations in combined group was significantly smaller than that of both α-LA alone group(P﹤0.01)and PDTC alone group(P﹤0.05). The result of Hoechst33258 staining and flow cytometry indicated that after combined treatment with PDTC 5 μmol·L-1 and α-LA 5 μmol·L-1 for 24 h,the level of apoptosis and the percentage of cells in G2 / M stage were significantly increased compared with PDTC alone or α-LA alone treatment. CONCLUSION α-LA can enhance the anti-proliferation and pro-apoptosis effect of PDTC in Hep-2 cells.
