华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2014年
3期
281-284
,共4页
Notch信号%角膜缘上皮细胞分化%黏液素5AC%转谷氨酰胺酶1
Notch信號%角膜緣上皮細胞分化%黏液素5AC%轉穀氨酰胺酶1
Notch신호%각막연상피세포분화%점액소5AC%전곡안선알매1
Notch signaling%corneal limbal epithelial cell differentiation%mucin 5AC%transglutaminase 1
目的 通过体外细胞分化模型探讨Notch信号通路对角膜缘上皮细胞分化过程中黏液素5AC(MUC5AC)表达的影响及其临床意义.方法 Western blot检测体外细胞培养24和48 h时Notch1、Notch2及Notch3蛋白在小鼠角膜缘上皮细胞中的表达情况;以小鼠体外正常培养角膜缘上皮细胞作为对照组,靶向转染Notch3 siRNA的细胞作为实验组,培养24、48和72 h后运用Western blot和Real-time PCR检测MUC5AC蛋白及mRNA的表达水平;RT-PCR检测转谷氨酰胺酶1 mRNA表达强度变化.结果 Western blot结果显示Notch3蛋白在角膜缘上皮细胞的表达最高,其次是Notch2,Notch1表达不明显.与对照组相比,实验组MUC5AC的蛋白合成及mRNA表达显著下降,其蛋白合成于24、48和72 h分别下降了(64.3±35.0)％、(39.5±11.0)％和(41.3±8.3)％;mRNA分别下降了(42.9±14.2)％、(45.0±18.0)％和(46.4±21.0)％;转谷氨酰胺酶1的基因表达明显增强,24、48和72 h分别增加了(75.2±11.3)％、(89.7±15.5)％和(101.0±25.0)％.结论 Notch信号通路可影响MUC5AC基因及蛋白合成,对Notch信号的调节可能是治疗黏液素分泌不足型眼表疾病的一个新途径.
目的 通過體外細胞分化模型探討Notch信號通路對角膜緣上皮細胞分化過程中黏液素5AC(MUC5AC)錶達的影響及其臨床意義.方法 Western blot檢測體外細胞培養24和48 h時Notch1、Notch2及Notch3蛋白在小鼠角膜緣上皮細胞中的錶達情況;以小鼠體外正常培養角膜緣上皮細胞作為對照組,靶嚮轉染Notch3 siRNA的細胞作為實驗組,培養24、48和72 h後運用Western blot和Real-time PCR檢測MUC5AC蛋白及mRNA的錶達水平;RT-PCR檢測轉穀氨酰胺酶1 mRNA錶達彊度變化.結果 Western blot結果顯示Notch3蛋白在角膜緣上皮細胞的錶達最高,其次是Notch2,Notch1錶達不明顯.與對照組相比,實驗組MUC5AC的蛋白閤成及mRNA錶達顯著下降,其蛋白閤成于24、48和72 h分彆下降瞭(64.3±35.0)％、(39.5±11.0)％和(41.3±8.3)％;mRNA分彆下降瞭(42.9±14.2)％、(45.0±18.0)％和(46.4±21.0)％;轉穀氨酰胺酶1的基因錶達明顯增彊,24、48和72 h分彆增加瞭(75.2±11.3)％、(89.7±15.5)％和(101.0±25.0)％.結論 Notch信號通路可影響MUC5AC基因及蛋白閤成,對Notch信號的調節可能是治療黏液素分泌不足型眼錶疾病的一箇新途徑.
목적 통과체외세포분화모형탐토Notch신호통로대각막연상피세포분화과정중점액소5AC(MUC5AC)표체적영향급기림상의의.방법 Western blot검측체외세포배양24화48 h시Notch1、Notch2급Notch3단백재소서각막연상피세포중적표체정황;이소서체외정상배양각막연상피세포작위대조조,파향전염Notch3 siRNA적세포작위실험조,배양24、48화72 h후운용Western blot화Real-time PCR검측MUC5AC단백급mRNA적표체수평;RT-PCR검측전곡안선알매1 mRNA표체강도변화.결과 Western blot결과현시Notch3단백재각막연상피세포적표체최고,기차시Notch2,Notch1표체불명현.여대조조상비,실험조MUC5AC적단백합성급mRNA표체현저하강,기단백합성우24、48화72 h분별하강료(64.3±35.0)％、(39.5±11.0)％화(41.3±8.3)％;mRNA분별하강료(42.9±14.2)％、(45.0±18.0)％화(46.4±21.0)％;전곡안선알매1적기인표체명현증강,24、48화72 h분별증가료(75.2±11.3)％、(89.7±15.5)％화(101.0±25.0)％.결론 Notch신호통로가영향MUC5AC기인급단백합성,대Notch신호적조절가능시치료점액소분비불족형안표질병적일개신도경.
