中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2014年
12期
6-10
,共5页
乌骨鸡%黑色素细胞%原代培养%鉴定
烏骨鷄%黑色素細胞%原代培養%鑒定
오골계%흑색소세포%원대배양%감정
为探讨获得大量高纯度乌骨鸡黑色素细胞不同方法的优劣,以及进一步研究马骨鸡黑色素细胞生物特性及其黑色素的生物合成,以1周龄乌骨鸡雏鸡腹侧皮肤作为黑色素细胞来源,采用胰蛋白酶、中性蛋白酶和胶原酶Ⅰ消化进行细胞产量和贴壁效率评估,杂细胞用十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)选择性消除,最后细胞长期培养在添加胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子、TPA和实验室自制活性肽的DMEM基础培养基中.利用多巴染色法、透射电镜对获得细胞的性质进行鉴定.结果显示,胶原酶Ⅰ较中性蛋白酶和胰蛋白酶消化分离获得的黑色素细胞具有更高细胞产量和细胞活力,原代培养5d后,达到融合,未见角质形成细胞和成纤维细胞污染.因此,采用胶原酶Ⅰ消化并使用添加多种刺激因子的培养基,可建立乌骨鸡黑色素细胞的有限细胞系.
為探討穫得大量高純度烏骨鷄黑色素細胞不同方法的優劣,以及進一步研究馬骨鷄黑色素細胞生物特性及其黑色素的生物閤成,以1週齡烏骨鷄雛鷄腹側皮膚作為黑色素細胞來源,採用胰蛋白酶、中性蛋白酶和膠原酶Ⅰ消化進行細胞產量和貼壁效率評估,雜細胞用十四烷酰彿波醇乙痠酯(TPA)選擇性消除,最後細胞長期培養在添加胎牛血清、堿性成纖維細胞生長因子、TPA和實驗室自製活性肽的DMEM基礎培養基中.利用多巴染色法、透射電鏡對穫得細胞的性質進行鑒定.結果顯示,膠原酶Ⅰ較中性蛋白酶和胰蛋白酶消化分離穫得的黑色素細胞具有更高細胞產量和細胞活力,原代培養5d後,達到融閤,未見角質形成細胞和成纖維細胞汙染.因此,採用膠原酶Ⅰ消化併使用添加多種刺激因子的培養基,可建立烏骨鷄黑色素細胞的有限細胞繫.
위탐토획득대량고순도오골계흑색소세포불동방법적우렬,이급진일보연구마골계흑색소세포생물특성급기흑색소적생물합성,이1주령오골계추계복측피부작위흑색소세포래원,채용이단백매、중성단백매화효원매Ⅰ소화진행세포산량화첩벽효솔평고,잡세포용십사완선불파순을산지(TPA)선택성소제,최후세포장기배양재첨가태우혈청、감성성섬유세포생장인자、TPA화실험실자제활성태적DMEM기출배양기중.이용다파염색법、투사전경대획득세포적성질진행감정.결과현시,효원매Ⅰ교중성단백매화이단백매소화분리획득적흑색소세포구유경고세포산량화세포활력,원대배양5d후,체도융합,미견각질형성세포화성섬유세포오염.인차,채용효원매Ⅰ소화병사용첨가다충자격인자적배양기,가건립오골계흑색소세포적유한세포계.
