CAJ | 학술논문

本研究旨在通过阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其免疫功能的变化,为应用于异基因骨髓移植的免疫耐受提供实验依据.将致敏的BALB/c小鼠分成4组:①CTLA4Ig+ anti-CD154鼠源性同型对照抗体;②anti-CD154单克隆抗体+CTLA4Ig鼠源性同型对照抗体;③CTLA4Ig+ anti-CD154单克隆抗体;④CTLA4Ig及anti-CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体.正常BALB/c小鼠应用CTLA4Ig及anti-CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体.给予每只小鼠CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体或相对应的同型对照抗体各500 μg,于移植前7天尾静脉输注,每组小鼠各5只.移植当天处死各组小鼠,应用流式细胞仪检测脾细胞中CD19+ CD69+B细胞数量、CD44high/CD62Lhigh及CD44high/CD62Llow/-T细胞数量.用流式细胞仪或ELISA法检测血清中抗体及细胞因子的变化.结果表明:小鼠致敏后CD19+ CD69+B细胞数量与正常小鼠相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),阻断B7/CD28或/和CD40/CD154共刺激信号通路后可见抑制效应(P＜0.01),两者同时阻断具有协同作用(P＜0.01).小鼠致敏后记忆性T细胞CD44high/CD62Lhigh及效应性T细胞CD44high/CD62Llow/-与正常相比亦明显增多(P＜0.01).阻断共刺激信号通路后可使其明显抑制,CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体联合应用具有协同效应(P＜0.01).各组小鼠细胞因子及IgG、IgM抗体均无明显差异(P＞0.05),但血清中致敏抗体检测显示致敏后特异性抗体升高,阻断共刺激信号通路后其明显被抑制(P＜0.01).结论:阻断B7/CD28或CD40/CD154共刺激信号途径均能抑制致敏小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能;同时阻断有协同作用.
본연구지재통과조단치민소서적B7/CD28급CD40/CD154공자격신호도경,탐토기면역공능적변화,위응용우이기인골수이식적면역내수제공실험의거.장치민적BALB/c소서분성4조:①CTLA4Ig+ anti-CD154서원성동형대조항체;②anti-CD154단극륭항체+CTLA4Ig서원성동형대조항체;③CTLA4Ig+ anti-CD154단극륭항체;④CTLA4Ig급anti-CD154단극륭항체적서원성동형대조항체.정상BALB/c소서응용CTLA4Ig급anti-CD154단극륭항체적서원성동형대조항체.급여매지소서CTLA4 Ig화anti-CD154단극륭항체혹상대응적동형대조항체각500 μg,우이식전7천미정맥수주,매조소서각5지.이식당천처사각조소서,응용류식세포의검측비세포중CD19+ CD69+B세포수량、CD44high/CD62Lhigh급CD44high/CD62Llow/-T세포수량.용류식세포의혹ELISA법검측혈청중항체급세포인자적변화.결과표명:소서치민후CD19+ CD69+B세포수량여정상소서상비명현승고,차이유통계학의의(P＜0.01),조단B7/CD28혹/화CD40/CD154공자격신호통로후가견억제효응(P＜0.01),량자동시조단구유협동작용(P＜0.01).소서치민후기억성T세포CD44high/CD62Lhigh급효응성T세포CD44high/CD62Llow/-여정상상비역명현증다(P＜0.01).조단공자격신호통로후가사기명현억제,CTLA4 Ig화anti-CD154단극륭항체연합응용구유협동효응(P＜0.01).각조소서세포인자급IgG、IgM항체균무명현차이(P＞0.05),단혈청중치민항체검측현시치민후특이성항체승고,조단공자격신호통로후기명현피억제(P＜0.01).결론:조단B7/CD28혹CD40/CD154공자격신호도경균능억제치민소서적세포면역공능급체액면역공능;동시조단유협동작용.