中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
3期
580-587
,共8页
刘淑平%李彦欣%许静%顾海慧%张鸿雁%梁昊岳%刘汉芝%张孝兵%程涛
劉淑平%李彥訢%許靜%顧海慧%張鴻雁%樑昊嶽%劉漢芝%張孝兵%程濤
류숙평%리언흔%허정%고해혜%장홍안%량호악%류한지%장효병%정도
诱导多能性干细胞%脐血%单个核细胞%Episomal载体%非整合
誘導多能性榦細胞%臍血%單箇覈細胞%Episomal載體%非整閤
유도다능성간세포%제혈%단개핵세포%Episomal재체%비정합
induced pluripotent stem cells%cord blood%mononuclear cells%episomal vector%integration-free
诱导多能性干细胞(iPSC)技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用.非整合质粒(Episomal)方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效率偏低,严重阻碍了其应用.本研究旨在优化Episomal方法,将脐血单个核细胞(CB MNC)重编程为诱导多能性干细胞(iPSC),建立无基因整合的iPSC的高效生成技术体系,为以后建立疾病iPSC奠定基础.利用CB MNC,通过比较不同氧含量,诱导质粒,MNC培养方法和预刺激时间等条件对Episomal方法进行优化.结果表明:CB MNC采用红系培养液,培养8d,使用启动子为SFFV (spleen focus forming virus)的Episomal载体,在低氧(3％)条件下诱导,CB MNC重编程效率最高,可达到0.12％.通过分析最佳条件下供体细胞成分发现,表型为CD36+ CD71+ CD235alow的有核红细胞是重编程最主要的供体细胞来源.结论:本研究成功建立并优化出一种可推广的高效安全的,可以用于临床应用研究的iPSC诱导技术.
誘導多能性榦細胞(iPSC)技術具有臨床應用前景,但iPSC的遺傳穩定性和成瘤性阻礙瞭其可能的臨床應用.非整閤質粒(Episomal)方法無外源基因整閤到宿主基因組上併且方法簡單,適宜推廣,是目前保證iPSC遺傳安全性的最佳方案之一,但其誘導效率偏低,嚴重阻礙瞭其應用.本研究旨在優化Episomal方法,將臍血單箇覈細胞(CB MNC)重編程為誘導多能性榦細胞(iPSC),建立無基因整閤的iPSC的高效生成技術體繫,為以後建立疾病iPSC奠定基礎.利用CB MNC,通過比較不同氧含量,誘導質粒,MNC培養方法和預刺激時間等條件對Episomal方法進行優化.結果錶明:CB MNC採用紅繫培養液,培養8d,使用啟動子為SFFV (spleen focus forming virus)的Episomal載體,在低氧(3％)條件下誘導,CB MNC重編程效率最高,可達到0.12％.通過分析最佳條件下供體細胞成分髮現,錶型為CD36+ CD71+ CD235alow的有覈紅細胞是重編程最主要的供體細胞來源.結論:本研究成功建立併優化齣一種可推廣的高效安全的,可以用于臨床應用研究的iPSC誘導技術.
유도다능성간세포(iPSC)기술구유림상응용전경,단iPSC적유전은정성화성류성조애료기가능적림상응용.비정합질립(Episomal)방법무외원기인정합도숙주기인조상병차방법간단,괄의추엄,시목전보증iPSC유전안전성적최가방안지일,단기유도효솔편저,엄중조애료기응용.본연구지재우화Episomal방법,장제혈단개핵세포(CB MNC)중편정위유도다능성간세포(iPSC),건립무기인정합적iPSC적고효생성기술체계,위이후건립질병iPSC전정기출.이용CB MNC,통과비교불동양함량,유도질립,MNC배양방법화예자격시간등조건대Episomal방법진행우화.결과표명:CB MNC채용홍계배양액,배양8d,사용계동자위SFFV (spleen focus forming virus)적Episomal재체,재저양(3％)조건하유도,CB MNC중편정효솔최고,가체도0.12％.통과분석최가조건하공체세포성분발현,표형위CD36+ CD71+ CD235alow적유핵홍세포시중편정최주요적공체세포래원.결론:본연구성공건립병우화출일충가추엄적고효안전적,가이용우림상응용연구적iPSC유도기술.
