浙江工业大学学报
浙江工業大學學報
절강공업대학학보
Journal of Zhejiang University of Technology
2014年
3期
334-337
,共4页
八聚精氨酸%反义寡核苷酸%细胞摄取%非病毒载体%脂质体
八聚精氨痠%反義寡覈苷痠%細胞攝取%非病毒載體%脂質體
팔취정안산%반의과핵감산%세포섭취%비병독재체%지질체
octaarginine%antisense oligodeoxynucleotide%cellular uptake%nonviral vector%liposome
用硬脂酰八聚精氨酸(R8)对普通脂质体进行修饰,以期获得高效低毒的反义寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体.修饰后的脂质体(R8-Lip)与反义寡核苷酸孵育,用琼脂糖凝胶电泳法考察复合物的形成情况;在肝癌细胞(HepG2)、肺癌细胞(A549)和口腔上皮癌细胞(KB)中,用MTT法评估R8-Lip的细胞毒性;同时考察在这三种细胞株中,R8的浓度与摄取效率的关系.当R8-Lip/ASODN复合物中正负电荷比(+/-)超过4∶1时,ASODN已与R8-Lip完全结合成带正电的复合物;当R8-Lip中R8的质量浓度小于10 μg/mL时,细胞存活率大于75％;R8-Lip对ASODN细胞摄取的促进作用与R8的浓度有关,当R8的质量浓度由0.3 μg/mL增加到9.6μg/mL(+/-由1∶2增加到16∶1),细胞内荧光强度逐渐增加;当R8-Lip/ASODN复合物中+/-=16∶1时,R8对ASODN摄取的促进作用强于市售的转染试剂Lipfectamine2000.因此,R8-Lip作为ASODN的载体,具备了高效低毒的优势,值得进一步深入研究.
用硬脂酰八聚精氨痠(R8)對普通脂質體進行脩飾,以期穫得高效低毒的反義寡覈苷痠(Antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)載體.脩飾後的脂質體(R8-Lip)與反義寡覈苷痠孵育,用瓊脂糖凝膠電泳法攷察複閤物的形成情況;在肝癌細胞(HepG2)、肺癌細胞(A549)和口腔上皮癌細胞(KB)中,用MTT法評估R8-Lip的細胞毒性;同時攷察在這三種細胞株中,R8的濃度與攝取效率的關繫.噹R8-Lip/ASODN複閤物中正負電荷比(+/-)超過4∶1時,ASODN已與R8-Lip完全結閤成帶正電的複閤物;噹R8-Lip中R8的質量濃度小于10 μg/mL時,細胞存活率大于75％;R8-Lip對ASODN細胞攝取的促進作用與R8的濃度有關,噹R8的質量濃度由0.3 μg/mL增加到9.6μg/mL(+/-由1∶2增加到16∶1),細胞內熒光彊度逐漸增加;噹R8-Lip/ASODN複閤物中+/-=16∶1時,R8對ASODN攝取的促進作用彊于市售的轉染試劑Lipfectamine2000.因此,R8-Lip作為ASODN的載體,具備瞭高效低毒的優勢,值得進一步深入研究.
용경지선팔취정안산(R8)대보통지질체진행수식,이기획득고효저독적반의과핵감산(Antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)재체.수식후적지질체(R8-Lip)여반의과핵감산부육,용경지당응효전영법고찰복합물적형성정황;재간암세포(HepG2)、폐암세포(A549)화구강상피암세포(KB)중,용MTT법평고R8-Lip적세포독성;동시고찰재저삼충세포주중,R8적농도여섭취효솔적관계.당R8-Lip/ASODN복합물중정부전하비(+/-)초과4∶1시,ASODN이여R8-Lip완전결합성대정전적복합물;당R8-Lip중R8적질량농도소우10 μg/mL시,세포존활솔대우75％;R8-Lip대ASODN세포섭취적촉진작용여R8적농도유관,당R8적질량농도유0.3 μg/mL증가도9.6μg/mL(+/-유1∶2증가도16∶1),세포내형광강도축점증가;당R8-Lip/ASODN복합물중+/-=16∶1시,R8대ASODN섭취적촉진작용강우시수적전염시제Lipfectamine2000.인차,R8-Lip작위ASODN적재체,구비료고효저독적우세,치득진일보심입연구.
