CAJ | 학술논문

目的:利用iCys激光定量成像细胞仪(iCys research imaging cytometer,RIC)对小鼠全心脏切片中标记的化学发光或荧光信号进行大面积、高速度、高分辨率的扫描,根据所获得图像统计分析小鼠全心脏切片中荧光和化学发光的阳性细胞比例,并分群追踪分析对象的图像以排查假阳性.方法:利用血管紧张素Ⅱ灌注小鼠,对心脏切片进行巨噬细胞特异性的mac-2抗体的免疫组化,通过光电二极管(photodiode,PD)检测器收集二氨基联苯胺法(DAB染色法)的化学发光信号获得全心脏相关影像,进而分析图片以统计全心脏中的巨噬细胞的阳性面积;利用小鼠心肌梗塞模型后心脏进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)标记,通过器光电倍增管(photo multiplier tube,PMT)检测器收集荧光信号获得全心脏相关影像,进而分析图片以统计全心脏中的细胞死亡率.结果:400倍放大时iCys激光定量成像细胞仪对小鼠全心脏切片的扫描花费大约20min,获得大约300张局部图片,软件自动拼合成全心脏切片图.通过对全心脏图片的统计分析显示:AngⅡ灌注的全心脏中DAB染色法显示的mac-2抗体阳性巨噬细胞阳性面积为(2.36±0.7)％;全心脏的TUNEL标记后荧光阳性的死亡细胞比率为(32.3±4.1)％.结论:iCys激光定量成像细胞仪可以对病理切片样本中的化学发光以及荧光信号进行大面积、高速度、高清晰的扫描,分析软件可以进行后期的图像的定性定量分析,并且可以通过对分析对象的追踪图像显示以明确统计分析的正确性.
목적:이용iCys격광정량성상세포의(iCys research imaging cytometer,RIC)대소서전심장절편중표기적화학발광혹형광신호진행대면적、고속도、고분변솔적소묘,근거소획득도상통계분석소서전심장절편중형광화화학발광적양성세포비례,병분군추종분석대상적도상이배사가양성.방법:이용혈관긴장소Ⅱ관주소서,대심장절편진행거서세포특이성적mac-2항체적면역조화,통과광전이겁관(photodiode,PD)검측기수집이안기련분알법(DAB염색법)적화학발광신호획득전심장상관영상,진이분석도편이통계전심장중적거서세포적양성면적;이용소서심기경새모형후심장진행말단탈양핵감산전이매개도적dUTP결구말단표기측정법(terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)표기,통과기광전배증관(photo multiplier tube,PMT)검측기수집형광신호획득전심장상관영상,진이분석도편이통계전심장중적세포사망솔.결과:400배방대시iCys격광정량성상세포의대소서전심장절편적소묘화비대약20min,획득대약300장국부도편,연건자동병합성전심장절편도.통과대전심장도편적통계분석현시:AngⅡ관주적전심장중DAB염색법현시적mac-2항체양성거서세포양성면적위(2.36±0.7)％;전심장적TUNEL표기후형광양성적사망세포비솔위(32.3±4.1)％.결론:iCys격광정량성상세포의가이대병리절편양본중적화학발광이급형광신호진행대면적、고속도、고청석적소묘,분석연건가이진행후기적도상적정성정량분석,병차가이통과대분석대상적추종도상현시이명학통계분석적정학성.