CAJ | 학술논문

基于课题组构建的野大豆碱胁迫基因转录谱和调控网络,筛选出两个碱胁迫应答关键基因:丝苏氨酸磷酸激酶(GsPPCK1和GsPPCK3).本研究构建了以35S为启动子,bar基因为筛选标记基因的植物超表达载体,以紫花苜蓿龙牧806子叶节为外植体,通过农杆菌介导法进行了GsPPCK1和GsPPCK3的苜蓿遗传转化;通过固沙草筛选GsPPCK1获得抗性植株45株,GsPPCK3获得53株;对抗性植株进行PCR和Real-time PCR检测,最终确定基因超量表达各2个株系.为进一步研究该基因的耐碱性,用NaHCO3分别为0 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L的4个浓度处理转基因苜蓿,9d后不同NaHCO3胁迫下对转基因株系进行耐碱性相关的生理指标分析,包括质膜透性、叶绿素含量、丙二醛含量、脯氨酸含量、柠檬酸含量、SOD活性及PEPC活性,结果表明:GsPPCK1和GsPPCK3在苜蓿中的超量表达显著提高了苜蓿的耐碱性.
기우과제조구건적야대두감협박기인전록보화조공망락,사선출량개감협박응답관건기인:사소안산린산격매(GsPPCK1화GsPPCK3).본연구구건료이35S위계동자,bar기인위사선표기기인적식물초표체재체,이자화목숙룡목806자협절위외식체,통과농간균개도법진행료GsPPCK1화GsPPCK3적목숙유전전화;통과고사초사선GsPPCK1획득항성식주45주,GsPPCK3획득53주;대항성식주진행PCR화Real-time PCR검측,최종학정기인초량표체각2개주계.위진일보연구해기인적내감성,용NaHCO3분별위0 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L적4개농도처리전기인목숙,9d후불동NaHCO3협박하대전기인주계진행내감성상관적생리지표분석,포괄질막투성、협록소함량、병이철함량、포안산함량、저몽산함량、SOD활성급PEPC활성,결과표명:GsPPCK1화GsPPCK3재목숙중적초량표체현저제고료목숙적내감성.