工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2014年
3期
25-29
,共5页
山梨醇脱氢酶%克隆%表达%氧化葡萄糖酸杆菌
山梨醇脫氫酶%剋隆%錶達%氧化葡萄糖痠桿菌
산리순탈경매%극륭%표체%양화포도당산간균
sorbitol dehydrogenase%cloning%expression%Gluconobacter oxydans
本研究构建了四株含有氧化葡萄糖酸杆菌山梨醇脱氢酶基因的重组大肠杆菌,并初步探究SldB和SldA亚基在山梨醇脱氢酶转化甘油反应中的作用.将pET28a、pETduet与PCR扩增的目的基因连接,构建单启动子调控重组质粒pET28a-sldB、pET28a-sldA、pET28a-sldBA和双启动子调控重组质粒pETduet-sldB'-sldA'.只有含pET28a-sldBA和pETduet-sldB'-sldA'的重组菌具有转化甘油的活性,表明G.oxydans WD的山梨醇脱氢酶催化甘油脱氢需要SldB和SldA亚基的共同作用.串联基因sldBA的蛋白表达结果与双启动子控制sldB和sldA基因蛋白表达结果基本相同,表明位于sldB基因末端的sldA的RBS序列可被E.coli C43的核糖体识别.
本研究構建瞭四株含有氧化葡萄糖痠桿菌山梨醇脫氫酶基因的重組大腸桿菌,併初步探究SldB和SldA亞基在山梨醇脫氫酶轉化甘油反應中的作用.將pET28a、pETduet與PCR擴增的目的基因連接,構建單啟動子調控重組質粒pET28a-sldB、pET28a-sldA、pET28a-sldBA和雙啟動子調控重組質粒pETduet-sldB'-sldA'.隻有含pET28a-sldBA和pETduet-sldB'-sldA'的重組菌具有轉化甘油的活性,錶明G.oxydans WD的山梨醇脫氫酶催化甘油脫氫需要SldB和SldA亞基的共同作用.串聯基因sldBA的蛋白錶達結果與雙啟動子控製sldB和sldA基因蛋白錶達結果基本相同,錶明位于sldB基因末耑的sldA的RBS序列可被E.coli C43的覈糖體識彆.
본연구구건료사주함유양화포도당산간균산리순탈경매기인적중조대장간균,병초보탐구SldB화SldA아기재산리순탈경매전화감유반응중적작용.장pET28a、pETduet여PCR확증적목적기인련접,구건단계동자조공중조질립pET28a-sldB、pET28a-sldA、pET28a-sldBA화쌍계동자조공중조질립pETduet-sldB'-sldA'.지유함pET28a-sldBA화pETduet-sldB'-sldA'적중조균구유전화감유적활성,표명G.oxydans WD적산리순탈경매최화감유탈경수요SldB화SldA아기적공동작용.천련기인sldBA적단백표체결과여쌍계동자공제sldB화sldA기인단백표체결과기본상동,표명위우sldB기인말단적sldA적RBS서렬가피E.coli C43적핵당체식별.
