工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2014年
3期
19-24
,共6页
宋琳琳%陈少云%吴坚平%杨立荣
宋琳琳%陳少雲%吳堅平%楊立榮
송림림%진소운%오견평%양립영
R-3-羟基丁酸%3HB%共表达
R-3-羥基丁痠%3HB%共錶達
R-3-간기정산%3HB%공표체
R-3-hydroxybutric acid%3HB%coexpression
通过PCR获得β-酮基硫解酶(PhaA)、乙酰乙酰辅酶A还原酶(PhaB)和硫酯酶(TesB)的基因phaA,phaB和tesB.以pACYCDuet-1、pRSFDuet-1、PET30a(+)为载体,以大肠杆菌表达型宿主E.coli BL21 (DE3)为宿主菌,分别构建了两株表达体系不同的工程菌,建立了R-3-羟基丁酸(3HB)的代谢途径,实现3HB的生物合成.将两株工程菌分别进行诱导表达及发酵,结果表明,三个基因均可在表达型宿主BL21(DE3)中进行活性表达,通过三个酶的连续催化生物合成3HB,并且三个基因的均衡表达更有利于3HB的生物合成.将phaAB基因簇构建在ACYCDuet-1上,tesB基因构建在RSFDuet-1上,获得的工程菌BL21(AAB+ RB),3HB产量可达到1.8 g/L.
通過PCR穫得β-酮基硫解酶(PhaA)、乙酰乙酰輔酶A還原酶(PhaB)和硫酯酶(TesB)的基因phaA,phaB和tesB.以pACYCDuet-1、pRSFDuet-1、PET30a(+)為載體,以大腸桿菌錶達型宿主E.coli BL21 (DE3)為宿主菌,分彆構建瞭兩株錶達體繫不同的工程菌,建立瞭R-3-羥基丁痠(3HB)的代謝途徑,實現3HB的生物閤成.將兩株工程菌分彆進行誘導錶達及髮酵,結果錶明,三箇基因均可在錶達型宿主BL21(DE3)中進行活性錶達,通過三箇酶的連續催化生物閤成3HB,併且三箇基因的均衡錶達更有利于3HB的生物閤成.將phaAB基因簇構建在ACYCDuet-1上,tesB基因構建在RSFDuet-1上,穫得的工程菌BL21(AAB+ RB),3HB產量可達到1.8 g/L.
통과PCR획득β-동기류해매(PhaA)、을선을선보매A환원매(PhaB)화류지매(TesB)적기인phaA,phaB화tesB.이pACYCDuet-1、pRSFDuet-1、PET30a(+)위재체,이대장간균표체형숙주E.coli BL21 (DE3)위숙주균,분별구건료량주표체체계불동적공정균,건립료R-3-간기정산(3HB)적대사도경,실현3HB적생물합성.장량주공정균분별진행유도표체급발효,결과표명,삼개기인균가재표체형숙주BL21(DE3)중진행활성표체,통과삼개매적련속최화생물합성3HB,병차삼개기인적균형표체경유리우3HB적생물합성.장phaAB기인족구건재ACYCDuet-1상,tesB기인구건재RSFDuet-1상,획득적공정균BL21(AAB+ RB),3HB산량가체도1.8 g/L.
