江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
6期
38-40
,共3页
杨京燕%葛亚英%田丹青
楊京燕%葛亞英%田丹青
양경연%갈아영%전단청
安祖花%ISSR%单因素试验%体系优化
安祖花%ISSR%單因素試驗%體繫優化
안조화%ISSR%단인소시험%체계우화
为建立适宜安祖花DNA的ISSR-PCR 扩增体系,采用单因子试验对影响 ISSR-PCR 反应的各组分( Taq DNA聚合酶、模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度)进行了优化,确立了适合安祖花的条带清晰、多态性高、重复性好的最佳ISSR-PCR反应体系,即在20μL PCR反应体系中含有10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq酶0.2μL、10μmol/L引物3.0μL、20 ng/μL模板2.0μL;并利用2条引物对15个安祖花品种进行了稳定性鉴定,为安祖花的遗传多样性分析及育种工作提供技术支持。
為建立適宜安祖花DNA的ISSR-PCR 擴增體繫,採用單因子試驗對影響 ISSR-PCR 反應的各組分( Taq DNA聚閤酶、模闆DNA、引物、dNTPs、Mg2+濃度)進行瞭優化,確立瞭適閤安祖花的條帶清晰、多態性高、重複性好的最佳ISSR-PCR反應體繫,即在20μL PCR反應體繫中含有10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq酶0.2μL、10μmol/L引物3.0μL、20 ng/μL模闆2.0μL;併利用2條引物對15箇安祖花品種進行瞭穩定性鑒定,為安祖花的遺傳多樣性分析及育種工作提供技術支持。
위건립괄의안조화DNA적ISSR-PCR 확증체계,채용단인자시험대영향 ISSR-PCR 반응적각조분( Taq DNA취합매、모판DNA、인물、dNTPs、Mg2+농도)진행료우화,학립료괄합안조화적조대청석、다태성고、중복성호적최가ISSR-PCR반응체계,즉재20μL PCR반응체계중함유10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq매0.2μL、10μmol/L인물3.0μL、20 ng/μL모판2.0μL;병이용2조인물대15개안조화품충진행료은정성감정,위안조화적유전다양성분석급육충공작제공기술지지。