CAJ | 학술논문

目的寻找简单、可靠、经济准确的检测巨噬细胞中Line-1甲基化水平的实验方法。方法体外培养单核细胞源性巨噬细胞，不同浓度Hcy作用后以甲基化特异性PCR检测Line-1 DNA甲基化水平变化后，分别克隆扩增相应的片段，将不同浓度稀释的甲基化和非甲基化样品分别加入到荧光PCR体系中，按照荧光PCR体系进行操作，检测其荧光表达，根据相应的稀释倍数与扩增数做出相应的标准曲线。结果各Hcy浓度组的Line-1 DNA甲基化程度随Hcy浓度的增高甲基化程度升高，Line-1 DNA甲基化程度与对照组比较，分别上升了1.30、1.52、1.61、2.18倍，差异有统计学意义(<0.05)；分别得到Line-1 DNA甲基化标准曲线：Y=-4.3448x+51.512；非甲基化标准曲线：Y=-2.7406x+36.208。结论 Line-1 DNA甲基化与Hcy介导的动脉粥样硬化关系密切，荧光定量PCR法建立的标准曲线是检测Line-1 DNA甲基化水平的一种方便且准确的方法。
목적심조간단、가고、경제준학적검측거서세포중Line-1갑기화수평적실험방법。방법체외배양단핵세포원성거서세포，불동농도Hcy작용후이갑기화특이성PCR검측Line-1 DNA갑기화수평변화후，분별극륭확증상응적편단，장불동농도희석적갑기화화비갑기화양품분별가입도형광PCR체계중，안조형광PCR체계진행조작，검측기형광표체，근거상응적희석배수여확증수주출상응적표준곡선。결과각Hcy농도조적Line-1 DNA갑기화정도수Hcy농도적증고갑기화정도승고，Line-1 DNA갑기화정도여대조조비교，분별상승료1.30、1.52、1.61、2.18배，차이유통계학의의(<0.05)；분별득도Line-1 DNA갑기화표준곡선：Y=-4.3448x+51.512；비갑기화표준곡선：Y=-2.7406x+36.208。결론 Line-1 DNA갑기화여Hcy개도적동맥죽양경화관계밀절，형광정량PCR법건립적표준곡선시검측Line-1 DNA갑기화수평적일충방편차준학적방법。