江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
8期
21-25,26
,共6页
郑苗苗%邵淑丽%张令昻%焦战战
鄭苗苗%邵淑麗%張令昻%焦戰戰
정묘묘%소숙려%장령앙%초전전
红平菇%漆酶基因%启动子克隆%转录调控
紅平菇%漆酶基因%啟動子剋隆%轉錄調控
홍평고%칠매기인%계동자극륭%전록조공
以优化后的漆酶培养基为基础,将RT-PCR、RACE技术相结合,从红平菇菌株中获得漆酶基因cDNA全长及Genomic DNA全长序列,Genomic DNA大小为2344 bp。通过对漆酶基因cDNA全长和Genomic DNA全长序列的比较,结果显示该基因包含13个外显子和12个内含子。基因cDNA全长为1746 bp,其中包含1个完整的ORF,长度为1590 bp,编码529个氨基酸。序列在氨基酸水平上与桃红侧耳Pleurotus salmoneostramineus的氨基酸序列具有较高的同源性,相似性达97%,与齿耳菌Steccherinum murashkinskyi漆酶氨基酸序列相似性达到72%。通过SEFA-PCR的方法,扩增得到漆酶基因起始密码子上游长1126 bp 的启动子序列。分析表明,该启动子区域上除分布有TATA-box、CAAT-box、AP2等基本的转录起始元件外,还存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括4个MRE元件、2个CreA热击元件、2个STRE元件、1个NIT2元件、1个HSEs元件、1个XRE异生物质反应元件、4个氮因子结合位点等。不同外源诱导物可以调节红平菇HP1漆酶基因的表达。
以優化後的漆酶培養基為基礎,將RT-PCR、RACE技術相結閤,從紅平菇菌株中穫得漆酶基因cDNA全長及Genomic DNA全長序列,Genomic DNA大小為2344 bp。通過對漆酶基因cDNA全長和Genomic DNA全長序列的比較,結果顯示該基因包含13箇外顯子和12箇內含子。基因cDNA全長為1746 bp,其中包含1箇完整的ORF,長度為1590 bp,編碼529箇氨基痠。序列在氨基痠水平上與桃紅側耳Pleurotus salmoneostramineus的氨基痠序列具有較高的同源性,相似性達97%,與齒耳菌Steccherinum murashkinskyi漆酶氨基痠序列相似性達到72%。通過SEFA-PCR的方法,擴增得到漆酶基因起始密碼子上遊長1126 bp 的啟動子序列。分析錶明,該啟動子區域上除分佈有TATA-box、CAAT-box、AP2等基本的轉錄起始元件外,還存在多箇潛在的順式作用元件序列位點,包括4箇MRE元件、2箇CreA熱擊元件、2箇STRE元件、1箇NIT2元件、1箇HSEs元件、1箇XRE異生物質反應元件、4箇氮因子結閤位點等。不同外源誘導物可以調節紅平菇HP1漆酶基因的錶達。
이우화후적칠매배양기위기출,장RT-PCR、RACE기술상결합,종홍평고균주중획득칠매기인cDNA전장급Genomic DNA전장서렬,Genomic DNA대소위2344 bp。통과대칠매기인cDNA전장화Genomic DNA전장서렬적비교,결과현시해기인포함13개외현자화12개내함자。기인cDNA전장위1746 bp,기중포함1개완정적ORF,장도위1590 bp,편마529개안기산。서렬재안기산수평상여도홍측이Pleurotus salmoneostramineus적안기산서렬구유교고적동원성,상사성체97%,여치이균Steccherinum murashkinskyi칠매안기산서렬상사성체도72%。통과SEFA-PCR적방법,확증득도칠매기인기시밀마자상유장1126 bp 적계동자서렬。분석표명,해계동자구역상제분포유TATA-box、CAAT-box、AP2등기본적전록기시원건외,환존재다개잠재적순식작용원건서렬위점,포괄4개MRE원건、2개CreA열격원건、2개STRE원건、1개NIT2원건、1개HSEs원건、1개XRE이생물질반응원건、4개담인자결합위점등。불동외원유도물가이조절홍평고HP1칠매기인적표체。