河北林业科技
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하북임업과기
THE JOURNAL OF HEBEI FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2014年
2期
1-3,4
,共4页
LBA4404%质粒%消除%十二烷基硫酸钠%高温
LBA4404%質粒%消除%十二烷基硫痠鈉%高溫
LBA4404%질립%소제%십이완기류산납%고온
通过提高生长温度和化学消除剂相结合的方法对菌株LBA4404中的质粒进行消除。将过夜培养的工程农杆菌LBA4404接种于含SDS(0%~0.08%)的新鲜YEB培养基中,于42益震荡培养72h。当SDS的浓度大于或等于0.06%时,菌体不能生长。SDS的亚致死浓度为0.05%。菌液稀释后涂YEB平板,将所有单菌落分别对应影印到普通YEB平板和抗性平板,检测由质粒编码的str和rif基因是否丢失,质粒的DNA电泳图像证实了LBA4404的衍生株3号、11号中的质粒已完全被消除,25号的质粒带明显变淡。
通過提高生長溫度和化學消除劑相結閤的方法對菌株LBA4404中的質粒進行消除。將過夜培養的工程農桿菌LBA4404接種于含SDS(0%~0.08%)的新鮮YEB培養基中,于42益震盪培養72h。噹SDS的濃度大于或等于0.06%時,菌體不能生長。SDS的亞緻死濃度為0.05%。菌液稀釋後塗YEB平闆,將所有單菌落分彆對應影印到普通YEB平闆和抗性平闆,檢測由質粒編碼的str和rif基因是否丟失,質粒的DNA電泳圖像證實瞭LBA4404的衍生株3號、11號中的質粒已完全被消除,25號的質粒帶明顯變淡。
통과제고생장온도화화학소제제상결합적방법대균주LBA4404중적질립진행소제。장과야배양적공정농간균LBA4404접충우함SDS(0%~0.08%)적신선YEB배양기중,우42익진탕배양72h。당SDS적농도대우혹등우0.06%시,균체불능생장。SDS적아치사농도위0.05%。균액희석후도YEB평판,장소유단균락분별대응영인도보통YEB평판화항성평판,검측유질립편마적str화rif기인시부주실,질립적DNA전영도상증실료LBA4404적연생주3호、11호중적질립이완전피소제,25호적질립대명현변담。