西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
4期
442-446
,共5页
郭波%王文静%赵正豪%赵凌宇%汪鲁敏%胡丽丽%宋土生%黄辰
郭波%王文靜%趙正豪%趙凌宇%汪魯敏%鬍麗麗%宋土生%黃辰
곽파%왕문정%조정호%조릉우%왕로민%호려려%송토생%황신
miR-338-3p%胃癌%表达载体%细胞增殖
miR-338-3p%胃癌%錶達載體%細胞增殖
miR-338-3p%위암%표체재체%세포증식
miR-338-3p%gastric cancer%expression vector%cell proliferation
目的 构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响.方法 以pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变.结果 测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖.结论 成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖.
目的 構建microR-338-3p(miR-338-3p)過錶達載體併探究其對人胃癌SGC-7901細胞繫體外增殖的影響.方法 以pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR真覈錶達載體為基礎,經EcoR Ⅰ和HindⅢ雙酶切和純化後與人工閤成miR-338-3p的寡聚覈苷痠進行連接,轉化至E.Coli Top10後,經過DNA測序、BLAST檢測及驗證;將構建成功的載體瞬時轉染入SGC-7901細胞繫中,應用Real-time PCR檢測miR-338-3p的錶達水平,利用MTT法檢測細胞增殖的改變.結果 測序驗證成功構建瞭miR-338-3p的真覈錶達載體;瞬時轉染SGC-7901細胞後miR-338-3p錶達水平有顯著增加,能夠抑製SGC-7901細胞的體外增殖.結論 成功構建瞭miR-338-3p的真覈錶達載體,穫得瞭瞬時錶達miR-338-3p的人胃癌SGC-7901細胞繫,初步證實miR-338-3p過錶達可抑製腫瘤細胞的增殖.
목적 구건microR-338-3p(miR-338-3p)과표체재체병탐구기대인위암SGC-7901세포계체외증식적영향.방법 이pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR진핵표체재체위기출,경EcoR Ⅰ화HindⅢ쌍매절화순화후여인공합성miR-338-3p적과취핵감산진행련접,전화지E.Coli Top10후,경과DNA측서、BLAST검측급험증;장구건성공적재체순시전염입SGC-7901세포계중,응용Real-time PCR검측miR-338-3p적표체수평,이용MTT법검측세포증식적개변.결과 측서험증성공구건료miR-338-3p적진핵표체재체;순시전염SGC-7901세포후miR-338-3p표체수평유현저증가,능구억제SGC-7901세포적체외증식.결론 성공구건료miR-338-3p적진핵표체재체,획득료순시표체miR-338-3p적인위암SGC-7901세포계,초보증실miR-338-3p과표체가억제종류세포적증식.