医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2014年
7期
75-79
,共5页
胡中杰%刘颖%仇丽霞%范作鹏%聂巍%梁珊%于红卫%金荣华
鬍中傑%劉穎%仇麗霞%範作鵬%聶巍%樑珊%于紅衛%金榮華
호중걸%류영%구려하%범작붕%섭외%량산%우홍위%금영화
丙型肝炎病毒%核心蛋白%干扰素刺激应答元件%干扰素刺激基因
丙型肝炎病毒%覈心蛋白%榦擾素刺激應答元件%榦擾素刺激基因
병형간염병독%핵심단백%간우소자격응답원건%간우소자격기인
Hepatitis C virus%Core protein%Interferon-stimulated response element%Interferon stimulated genes
目的 探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV) 1b基因型(genotype 1b,GT-1b)C区氨基酸(amino acid,aa)70替代对干扰素刺激应答元件(interferon-stimulated response element,ISRE)的影响.方法 首先构建HCV GT-1b C区aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,测序鉴定后瞬时转染肝瘤细胞系Huh7细胞,Western blot法鉴定HCV核心蛋白的成功表达;然后利用ISRE双荧光素酶报告基因实验检测核心蛋白表达对ISRE活化的影响,并以SYBR Green real-time PCR检测3种主要干扰素刺激基因(interferon stimulated genes,ISGs)的表达情况.结果 构建了HCV aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,并在体外培养细胞中成功表达.但野生型和变异型核心蛋白表达对ISRE活化及3种主要ISGs表达的影响无明显差异.结论 单纯R70Q/H变异的核心蛋白似乎并不足以直接导致IFNα耐药.
目的 探討丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV) 1b基因型(genotype 1b,GT-1b)C區氨基痠(amino acid,aa)70替代對榦擾素刺激應答元件(interferon-stimulated response element,ISRE)的影響.方法 首先構建HCV GT-1b C區aa70野生型和變異型覈心蛋白錶達質粒,測序鑒定後瞬時轉染肝瘤細胞繫Huh7細胞,Western blot法鑒定HCV覈心蛋白的成功錶達;然後利用ISRE雙熒光素酶報告基因實驗檢測覈心蛋白錶達對ISRE活化的影響,併以SYBR Green real-time PCR檢測3種主要榦擾素刺激基因(interferon stimulated genes,ISGs)的錶達情況.結果 構建瞭HCV aa70野生型和變異型覈心蛋白錶達質粒,併在體外培養細胞中成功錶達.但野生型和變異型覈心蛋白錶達對ISRE活化及3種主要ISGs錶達的影響無明顯差異.結論 單純R70Q/H變異的覈心蛋白似乎併不足以直接導緻IFNα耐藥.
목적 탐토병형간염병독(hepatitis C Virus,HCV) 1b기인형(genotype 1b,GT-1b)C구안기산(amino acid,aa)70체대대간우소자격응답원건(interferon-stimulated response element,ISRE)적영향.방법 수선구건HCV GT-1b C구aa70야생형화변이형핵심단백표체질립,측서감정후순시전염간류세포계Huh7세포,Western blot법감정HCV핵심단백적성공표체;연후이용ISRE쌍형광소매보고기인실험검측핵심단백표체대ISRE활화적영향,병이SYBR Green real-time PCR검측3충주요간우소자격기인(interferon stimulated genes,ISGs)적표체정황.결과 구건료HCV aa70야생형화변이형핵심단백표체질립,병재체외배양세포중성공표체.단야생형화변이형핵심단백표체대ISRE활화급3충주요ISGs표체적영향무명현차이.결론 단순R70Q/H변이적핵심단백사호병불족이직접도치IFNα내약.
