CAJ | 학술논문

草莓是研究果实发育的模式植物.基因表达谱分析已成为目前分子生物学领域重要的研究方向.草莓cDNA文库构建是研究果实发育基因表达的基础工作.本研究从草莓白果中提取高质量的总RNA,通过MMLV反转录酶的作用,把RNA中的mRNA反转成cDNA第一链,再利用特异引物通过LD-PCR扩增合成双链cDNA.将纯化带有黏性末端的双链cDNA与λTrip I Ex2载体进行连接,最后对重组载体进行E.coli XL1-Blue体外包埋为cDNA原始文库.经过鉴定,原始文库的滴度为1.13×10-7 cfu/mL,重组率为100％,插入片段多分布在0.2～2.0 kb之间,表明构建的草莓果实cDNA文库质量较高,能够满足后续的分子生物学研究工作的需要,同时也为其他果树相关研究提供借鉴.
초매시연구과실발육적모식식물.기인표체보분석이성위목전분자생물학영역중요적연구방향.초매cDNA문고구건시연구과실발육기인표체적기출공작.본연구종초매백과중제취고질량적총RNA,통과MMLV반전록매적작용,파RNA중적mRNA반전성cDNA제일련,재이용특이인물통과LD-PCR확증합성쌍련cDNA.장순화대유점성말단적쌍련cDNA여λTrip I Ex2재체진행련접,최후대중조재체진행E.coli XL1-Blue체외포매위cDNA원시문고.경과감정,원시문고적적도위1.13×10-7 cfu/mL,중조솔위100％,삽입편단다분포재0.2～2.0 kb지간,표명구건적초매과실cDNA문고질량교고,능구만족후속적분자생물학연구공작적수요,동시야위기타과수상관연구제공차감.