北京农学院学报
北京農學院學報
북경농학원학보
JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
2014年
2期
9-11
,共3页
草莓%总RNA%果实%RNA提取%RT-PCR
草莓%總RNA%果實%RNA提取%RT-PCR
초매%총RNA%과실%RNA제취%RT-PCR
strawberry%total RNA,fruit,RNA extraction,RT-PCR
探讨一种适于草莓不同组织的RNA提取的改良方法.通过增加裂解液震荡强度、离心柱多次吸附、增加去蛋白液温育次数及漂洗次数等步骤对EASYspin RNA提取总RNA操作方法进行改进.结果表明,改良方法提取的草莓根、茎、叶、果实、花中的总RNA,电泳检测都出现清晰的28 S和18 S两条明显的条带,表明总RNA完整性较好;紫外分光计分析其OD260/OD280值在1.88至2.06之间,OD260/OD230值均大于2.0,RNA浓度含量为310～500 μg/mL,表明提取的总RNA纯度好、含量高;基于RNA中mRNA反转录的RT-PCR扩增Actin基因分析结果表明,改良方法提取的草莓不同组织的总RNA质量高.总之,经过电泳、紫外、反转录分析结果证实,改良EASYspin适于草莓果实等不同组织总RNA的提取,是草莓类似果树种类总RNA提取的首选借鉴方法.
探討一種適于草莓不同組織的RNA提取的改良方法.通過增加裂解液震盪彊度、離心柱多次吸附、增加去蛋白液溫育次數及漂洗次數等步驟對EASYspin RNA提取總RNA操作方法進行改進.結果錶明,改良方法提取的草莓根、莖、葉、果實、花中的總RNA,電泳檢測都齣現清晰的28 S和18 S兩條明顯的條帶,錶明總RNA完整性較好;紫外分光計分析其OD260/OD280值在1.88至2.06之間,OD260/OD230值均大于2.0,RNA濃度含量為310～500 μg/mL,錶明提取的總RNA純度好、含量高;基于RNA中mRNA反轉錄的RT-PCR擴增Actin基因分析結果錶明,改良方法提取的草莓不同組織的總RNA質量高.總之,經過電泳、紫外、反轉錄分析結果證實,改良EASYspin適于草莓果實等不同組織總RNA的提取,是草莓類似果樹種類總RNA提取的首選藉鑒方法.
탐토일충괄우초매불동조직적RNA제취적개량방법.통과증가렬해액진탕강도、리심주다차흡부、증가거단백액온육차수급표세차수등보취대EASYspin RNA제취총RNA조작방법진행개진.결과표명,개량방법제취적초매근、경、협、과실、화중적총RNA,전영검측도출현청석적28 S화18 S량조명현적조대,표명총RNA완정성교호;자외분광계분석기OD260/OD280치재1.88지2.06지간,OD260/OD230치균대우2.0,RNA농도함량위310～500 μg/mL,표명제취적총RNA순도호、함량고;기우RNA중mRNA반전록적RT-PCR확증Actin기인분석결과표명,개량방법제취적초매불동조직적총RNA질량고.총지,경과전영、자외、반전록분석결과증실,개량EASYspin괄우초매과실등불동조직총RNA적제취,시초매유사과수충류총RNA제취적수선차감방법.
