农业科学与技术（英文版）
農業科學與技術（英文版）
농업과학여기술（영문판）
AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY
2014年
6期
907-915
,共9页
刘世才%柴晓杰%郭卫华%王逸云%韩冬梅
劉世纔%柴曉傑%郭衛華%王逸雲%韓鼕梅
류세재%시효걸%곽위화%왕일운%한동매
杜氏盐藻%淀粉磷酸化酶基因%克隆%生物信息学%原核表达
杜氏鹽藻%澱粉燐痠化酶基因%剋隆%生物信息學%原覈錶達
두씨염조%정분린산화매기인%극륭%생물신식학%원핵표체
Dunaliella salina%Starch phosphorylase gene%Clone%Bioinformatics%Prokaryotic expression
[目的]克隆盐藻淀粉磷酸化酶基因,并初步分析其基本性质和表达蛋白.[方法]采用RT-PCR和RACE的方法克隆基因;生物信息学系统分析其性质;构建原核表达载PGS21a-DsSP转化于E.coli BL21表达蛋白,采用GST-SefinoseTMKit和Western Blot分别纯化、检测该融合蛋白.[结果]成功克隆出1种淀粉磷酸化酶(GenBank accession No.KF061044)命名为DsSP;分析得到了其基本性质并预测了该蛋白的亚细胞定位、二级结构和三级结构;该融合蛋白在上清和包涵体中均存在,且对上清蛋白成功纯化;Western Blot检测表明其在E.coli.BL21中成功表达.[结论]为进一步阐明DsSP的功能及作用机制奠定了理论基础.
[目的]剋隆鹽藻澱粉燐痠化酶基因,併初步分析其基本性質和錶達蛋白.[方法]採用RT-PCR和RACE的方法剋隆基因;生物信息學繫統分析其性質;構建原覈錶達載PGS21a-DsSP轉化于E.coli BL21錶達蛋白,採用GST-SefinoseTMKit和Western Blot分彆純化、檢測該融閤蛋白.[結果]成功剋隆齣1種澱粉燐痠化酶(GenBank accession No.KF061044)命名為DsSP;分析得到瞭其基本性質併預測瞭該蛋白的亞細胞定位、二級結構和三級結構;該融閤蛋白在上清和包涵體中均存在,且對上清蛋白成功純化;Western Blot檢測錶明其在E.coli.BL21中成功錶達.[結論]為進一步闡明DsSP的功能及作用機製奠定瞭理論基礎.
[목적]극륭염조정분린산화매기인,병초보분석기기본성질화표체단백.[방법]채용RT-PCR화RACE적방법극륭기인;생물신식학계통분석기성질;구건원핵표체재PGS21a-DsSP전화우E.coli BL21표체단백,채용GST-SefinoseTMKit화Western Blot분별순화、검측해융합단백.[결과]성공극륭출1충정분린산화매(GenBank accession No.KF061044)명명위DsSP;분석득도료기기본성질병예측료해단백적아세포정위、이급결구화삼급결구;해융합단백재상청화포함체중균존재,차대상청단백성공순화;Western Blot검측표명기재E.coli.BL21중성공표체.[결론]위진일보천명DsSP적공능급작용궤제전정료이론기출.
