食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
11期
143-148
,共6页
丁叶梅%贠建民%魏龙%陈芳%艾对元%张紊玮
丁葉梅%贠建民%魏龍%陳芳%艾對元%張紊瑋
정협매%원건민%위룡%진방%애대원%장문위
碎囊毛霉%β-1,3-1,4-葡聚糖酶%分离纯化%酶学性质
碎囊毛黴%β-1,3-1,4-葡聚糖酶%分離純化%酶學性質
쇄낭모매%β-1,3-1,4-포취당매%분리순화%매학성질
Mucor petrinsularis%β-1,3-1,4-glucanase%separation and purification%enzymatic properties
基于碎囊毛霉M-28固态发酵方式,采用单因素试验对其所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行提取纯化条件优化,并开展部分酶学性质研究.结果表明:用pH 5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液在200 r/min浸提固态发酵基质30 min,所得粗酶液经饱和度80％硫酸铵盐析、24 h透析浓缩、Sephadex G-100柱层析分离后,经紫外分光光度计检测,得到2个蛋白峰,酶活力测定发现有一个峰具有酶活性,收集该酶活组分并采用聚乙二醇高度吸附浓缩,再用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度检验,纯化酶蛋白呈单一谱带,分子质量约为17.2 kD,酶比活力达到225.02 U/mg,纯度较粗酶液提高了2.48倍.酶的最适反应温度为55℃、在40～50℃时相对稳定,其最适pH值为5.5、酶活力在pH 4.5～5.5条件下相对稳定.Fe3+和Al3+对该酶具有明显抑制作用,Fe2+对其有激活作用,其他金属离子影响不大.
基于碎囊毛黴M-28固態髮酵方式,採用單因素試驗對其所產β-1,3-1,4-葡聚糖酶進行提取純化條件優化,併開展部分酶學性質研究.結果錶明:用pH 5.5的乙痠-乙痠鈉緩遲溶液在200 r/min浸提固態髮酵基質30 min,所得粗酶液經飽和度80％硫痠銨鹽析、24 h透析濃縮、Sephadex G-100柱層析分離後,經紫外分光光度計檢測,得到2箇蛋白峰,酶活力測定髮現有一箇峰具有酶活性,收集該酶活組分併採用聚乙二醇高度吸附濃縮,再用十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進行純度檢驗,純化酶蛋白呈單一譜帶,分子質量約為17.2 kD,酶比活力達到225.02 U/mg,純度較粗酶液提高瞭2.48倍.酶的最適反應溫度為55℃、在40～50℃時相對穩定,其最適pH值為5.5、酶活力在pH 4.5～5.5條件下相對穩定.Fe3+和Al3+對該酶具有明顯抑製作用,Fe2+對其有激活作用,其他金屬離子影響不大.
기우쇄낭모매M-28고태발효방식,채용단인소시험대기소산β-1,3-1,4-포취당매진행제취순화조건우화,병개전부분매학성질연구.결과표명:용pH 5.5적을산-을산납완충용액재200 r/min침제고태발효기질30 min,소득조매액경포화도80％류산안염석、24 h투석농축、Sephadex G-100주층석분리후,경자외분광광도계검측,득도2개단백봉,매활력측정발현유일개봉구유매활성,수집해매활조분병채용취을이순고도흡부농축,재용십이완기류산납-취병희선알응효전영법진행순도검험,순화매단백정단일보대,분자질량약위17.2 kD,매비활력체도225.02 U/mg,순도교조매액제고료2.48배.매적최괄반응온도위55℃、재40～50℃시상대은정,기최괄pH치위5.5、매활력재pH 4.5～5.5조건하상대은정.Fe3+화Al3+대해매구유명현억제작용,Fe2+대기유격활작용,기타금속리자영향불대.
