山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
27期
31-33
,共3页
宋明艳%李娜%姜彦%于龙刚
宋明豔%李娜%薑彥%于龍剛
송명염%리나%강언%우룡강
骨髓间充质干细胞%全骨髓贴壁法%诱导分化
骨髓間充質榦細胞%全骨髓貼壁法%誘導分化
골수간충질간세포%전골수첩벽법%유도분화
目的:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行成骨、脂肪细胞诱导分化及鉴定。方法采用全骨髓贴壁法分离培养兔BMSCs ,倒置显微镜下观察细胞的形态及生长状况;分别绘制BM-SCs的生长曲线及贴壁率曲线,检测细胞活性;诱导细胞向脂肪及成骨细胞方向分化,检测细胞的多向分化潜能。结果分离培养的原代BMSCs 24 h出现贴壁现象,6 d后出现明显的集落生长,传代后细胞呈长梭形,形态均一,纯度高。 P3代细胞培养2 h贴壁30%以上,4 h贴壁60%,8 h贴壁70%以上,12 h贴壁90%。细胞生长曲线呈S形,显示细胞分别在第2、3、8天进入潜伏期、对数期、平台期。加入成骨及脂肪细胞诱导剂后,细胞碱性磷酸酶及油红O染色均阳性,表现出成骨及脂肪细胞的生物学特征。结论全骨髓贴壁法分离培养获得的细胞纯度较高,活性较强,增殖快,且具有BMSCs的一般生物学特性,此方法可以作为组织工程获取BMSCs的一种常用方法。
目的:採用全骨髓貼壁法體外分離培養兔骨髓間充質榦細胞(BMSCs),併進行成骨、脂肪細胞誘導分化及鑒定。方法採用全骨髓貼壁法分離培養兔BMSCs ,倒置顯微鏡下觀察細胞的形態及生長狀況;分彆繪製BM-SCs的生長麯線及貼壁率麯線,檢測細胞活性;誘導細胞嚮脂肪及成骨細胞方嚮分化,檢測細胞的多嚮分化潛能。結果分離培養的原代BMSCs 24 h齣現貼壁現象,6 d後齣現明顯的集落生長,傳代後細胞呈長梭形,形態均一,純度高。 P3代細胞培養2 h貼壁30%以上,4 h貼壁60%,8 h貼壁70%以上,12 h貼壁90%。細胞生長麯線呈S形,顯示細胞分彆在第2、3、8天進入潛伏期、對數期、平檯期。加入成骨及脂肪細胞誘導劑後,細胞堿性燐痠酶及油紅O染色均暘性,錶現齣成骨及脂肪細胞的生物學特徵。結論全骨髓貼壁法分離培養穫得的細胞純度較高,活性較彊,增殖快,且具有BMSCs的一般生物學特性,此方法可以作為組織工程穫取BMSCs的一種常用方法。
목적:채용전골수첩벽법체외분리배양토골수간충질간세포(BMSCs),병진행성골、지방세포유도분화급감정。방법채용전골수첩벽법분리배양토BMSCs ,도치현미경하관찰세포적형태급생장상황;분별회제BM-SCs적생장곡선급첩벽솔곡선,검측세포활성;유도세포향지방급성골세포방향분화,검측세포적다향분화잠능。결과분리배양적원대BMSCs 24 h출현첩벽현상,6 d후출현명현적집락생장,전대후세포정장사형,형태균일,순도고。 P3대세포배양2 h첩벽30%이상,4 h첩벽60%,8 h첩벽70%이상,12 h첩벽90%。세포생장곡선정S형,현시세포분별재제2、3、8천진입잠복기、대수기、평태기。가입성골급지방세포유도제후,세포감성린산매급유홍O염색균양성,표현출성골급지방세포적생물학특정。결론전골수첩벽법분리배양획득적세포순도교고,활성교강,증식쾌,차구유BMSCs적일반생물학특성,차방법가이작위조직공정획취BMSCs적일충상용방법。