广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
15期
2312-2316
,共5页
王和庚%黎洪棉%徐房添%赵培冉%梁双武
王和庚%黎洪棉%徐房添%趙培冉%樑雙武
왕화경%려홍면%서방첨%조배염%량쌍무
富血小板血浆%骨髓间充质干细胞%组织工程%细胞增殖%成骨分化
富血小闆血漿%骨髓間充質榦細胞%組織工程%細胞增殖%成骨分化
부혈소판혈장%골수간충질간세포%조직공정%세포증식%성골분화
platelet-rich plasma%bone marrow mesenchymal stem cells%tissue engineering%cell proliferation%osteogenic differentiation
目的 探讨不同浓度的富血小板血浆(PRP)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨能力的影响.方法 取大鼠骨髓组织,密度梯度离心法体外分离培养BMSCs.取第3代细胞接种,分别加入含0.5％、1％、2％、5％、10％ PRP的成骨诱导液或DMEM培养基进行培养,并以加入不含PRP的成骨诱导液或DMEM培养基培养(0 PRP)的BMSCs作对照.采用XTr比色法测定BMSCs的增殖情况.分别于培养3、7、11d时用ELISA法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,培养7、14、21 d时用放射免疫法检测骨钙素(OCN)表达量,培养21 d时用茜素红染色观察钙化结节形成能力.结果 成骨诱导培养的前7d,PRP可促进BMSCs增殖,成骨诱导培养7d以后,PRP也可促进BMSCs的成骨分化,且随着PRP浓度的增加,促细胞增殖、分化和成骨能力逐渐增强.PRP促进BMSCs内ALP活性和OCN表达的作用也呈剂量依赖性.成骨诱导培养21 d后,5％、10％的PRP诱导钙化结节形成能力优于0.5％、1％和2％的RPR,0 PRP培养的BMSC仅见少量钙化结节形成.结论 在体外成骨诱导培养条件下,RPR能有效促进BMSCs的生长增殖和成骨分化,以浓度10％为最佳.
目的 探討不同濃度的富血小闆血漿(PRP)對體外培養的大鼠骨髓間充質榦細胞(BMSCs)增殖及成骨能力的影響.方法 取大鼠骨髓組織,密度梯度離心法體外分離培養BMSCs.取第3代細胞接種,分彆加入含0.5％、1％、2％、5％、10％ PRP的成骨誘導液或DMEM培養基進行培養,併以加入不含PRP的成骨誘導液或DMEM培養基培養(0 PRP)的BMSCs作對照.採用XTr比色法測定BMSCs的增殖情況.分彆于培養3、7、11d時用ELISA法測定細胞堿性燐痠酶(ALP)活性,培養7、14、21 d時用放射免疫法檢測骨鈣素(OCN)錶達量,培養21 d時用茜素紅染色觀察鈣化結節形成能力.結果 成骨誘導培養的前7d,PRP可促進BMSCs增殖,成骨誘導培養7d以後,PRP也可促進BMSCs的成骨分化,且隨著PRP濃度的增加,促細胞增殖、分化和成骨能力逐漸增彊.PRP促進BMSCs內ALP活性和OCN錶達的作用也呈劑量依賴性.成骨誘導培養21 d後,5％、10％的PRP誘導鈣化結節形成能力優于0.5％、1％和2％的RPR,0 PRP培養的BMSC僅見少量鈣化結節形成.結論 在體外成骨誘導培養條件下,RPR能有效促進BMSCs的生長增殖和成骨分化,以濃度10％為最佳.
목적 탐토불동농도적부혈소판혈장(PRP)대체외배양적대서골수간충질간세포(BMSCs)증식급성골능력적영향.방법 취대서골수조직,밀도제도리심법체외분리배양BMSCs.취제3대세포접충,분별가입함0.5％、1％、2％、5％、10％ PRP적성골유도액혹DMEM배양기진행배양,병이가입불함PRP적성골유도액혹DMEM배양기배양(0 PRP)적BMSCs작대조.채용XTr비색법측정BMSCs적증식정황.분별우배양3、7、11d시용ELISA법측정세포감성린산매(ALP)활성,배양7、14、21 d시용방사면역법검측골개소(OCN)표체량,배양21 d시용천소홍염색관찰개화결절형성능력.결과 성골유도배양적전7d,PRP가촉진BMSCs증식,성골유도배양7d이후,PRP야가촉진BMSCs적성골분화,차수착PRP농도적증가,촉세포증식、분화화성골능력축점증강.PRP촉진BMSCs내ALP활성화OCN표체적작용야정제량의뢰성.성골유도배양21 d후,5％、10％적PRP유도개화결절형성능력우우0.5％、1％화2％적RPR,0 PRP배양적BMSC부견소량개화결절형성.결론 재체외성골유도배양조건하,RPR능유효촉진BMSCs적생장증식화성골분화,이농도10％위최가.
