中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2014年
4期
67-71
,共5页
李芬%胡涛%谢汝婷%刘伟%程天印%李娜
李芬%鬍濤%謝汝婷%劉偉%程天印%李娜
리분%호도%사여정%류위%정천인%리나
羊%食道口线虫%SRAP%正交设计
羊%食道口線蟲%SRAP%正交設計
양%식도구선충%SRAP%정교설계
Goat%Oesophagostomum%SRAP%orthogonal design
本研究利用正交设计L16（4）对羊食道口线虫SRAP-PCR反应体系的4因素：Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物进行摸索。结果表明：各因素的不同水平对SRAP-PCR反应结果都有显著的影响，正交设计组合4中扩增的条带最清晰；羊食道口线虫SRAP-PCR最佳反应条件：最佳引物给合为Me1/Em7，最佳反应体系为25μL：2.5μL 10×PCR buffer、20 ng模板DNA、Mg2+（25 mmol/L）3μL、dNTPs （2.5 mmol/L/μL）3μL、引物（10 pmol/μL）4μL、rTaq DNA聚合酶（5U/μL）0.2μL、灭菌ddH20补足。本研究结果为进一步采用SRAP技术来研究食道口线虫遗传进化奠定了坚实基础。
本研究利用正交設計L16（4）對羊食道口線蟲SRAP-PCR反應體繫的4因素：Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物進行摸索。結果錶明：各因素的不同水平對SRAP-PCR反應結果都有顯著的影響，正交設計組閤4中擴增的條帶最清晰；羊食道口線蟲SRAP-PCR最佳反應條件：最佳引物給閤為Me1/Em7，最佳反應體繫為25μL：2.5μL 10×PCR buffer、20 ng模闆DNA、Mg2+（25 mmol/L）3μL、dNTPs （2.5 mmol/L/μL）3μL、引物（10 pmol/μL）4μL、rTaq DNA聚閤酶（5U/μL）0.2μL、滅菌ddH20補足。本研究結果為進一步採用SRAP技術來研究食道口線蟲遺傳進化奠定瞭堅實基礎。
본연구이용정교설계L16（4）대양식도구선충SRAP-PCR반응체계적4인소：Taq매、Mg2+、dNTPs、인물진행모색。결과표명：각인소적불동수평대SRAP-PCR반응결과도유현저적영향，정교설계조합4중확증적조대최청석；양식도구선충SRAP-PCR최가반응조건：최가인물급합위Me1/Em7，최가반응체계위25μL：2.5μL 10×PCR buffer、20 ng모판DNA、Mg2+（25 mmol/L）3μL、dNTPs （2.5 mmol/L/μL）3μL、인물（10 pmol/μL）4μL、rTaq DNA취합매（5U/μL）0.2μL、멸균ddH20보족。본연구결과위진일보채용SRAP기술래연구식도구선충유전진화전정료견실기출。
In order to know the genetic diversity of Oesophagostomum of goat using SRAP-PCR, four factors, including DNA polymerase, Mg2+, dNTPs and primers in SRAP-PCR system were optimized using orthogonal design. The result should 25μL optimized SRAP-PCR system contains 2.5μL 10×PCR buffer, 20 ng DNA template, 3μL 25 mmol/L Mg2+, 3μL 2.5 mmol/L dNTPs, 4μL 10 pmol/μL primers, 0.2 μL rTaq DNA polymerase (5U/μL) and dd H2O. The results built a base for the study of genetic evolution of Oesophagostomum using SRAP technology.
