中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
9期
720-722
,共3页
李佳%张杨%王振宝%李永畅%巴音查汗
李佳%張楊%王振寶%李永暢%巴音查汗
리가%장양%왕진보%리영창%파음사한
马泰勒虫%荧光定量PCR%TaqMan探针%检测
馬泰勒蟲%熒光定量PCR%TaqMan探針%檢測
마태륵충%형광정량PCR%TaqMan탐침%검측
T.equi%real-time PCR%TaqMan probe%detection
为建立马泰勒虫(T.equi)敏感、快速的定量检测方法,本研究根据GenBank中登录的T.equi 18SrRNA保守序列设计一对特异性引物和TaqMan探针,经过反应体系及条件优化,建立了T.equi荧光定量PCR检测方法.结果显示,该方法的灵敏度可达10拷贝/μL,比普通PCR灵敏度高1 000倍;该方法可以特异地检测T.equi,对马驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫与牛环形泰勒虫的检测均为阴性;组内及组间重复试验变异系数均小于3％.对50份临床样品进行检测,荧光定量PCR的阳性检出率为40％,常规PCR的阳性检出率仅为34％.该检测方法的建立为T.equi的流行病学调查和实验研究提供了一种敏感特异的定量检测方法.
為建立馬泰勒蟲(T.equi)敏感、快速的定量檢測方法,本研究根據GenBank中登錄的T.equi 18SrRNA保守序列設計一對特異性引物和TaqMan探針,經過反應體繫及條件優化,建立瞭T.equi熒光定量PCR檢測方法.結果顯示,該方法的靈敏度可達10拷貝/μL,比普通PCR靈敏度高1 000倍;該方法可以特異地檢測T.equi,對馬駑巴貝斯蟲、牛巴貝斯蟲、雙芽巴貝斯蟲與牛環形泰勒蟲的檢測均為陰性;組內及組間重複試驗變異繫數均小于3％.對50份臨床樣品進行檢測,熒光定量PCR的暘性檢齣率為40％,常規PCR的暘性檢齣率僅為34％.該檢測方法的建立為T.equi的流行病學調查和實驗研究提供瞭一種敏感特異的定量檢測方法.
위건립마태륵충(T.equi)민감、쾌속적정량검측방법,본연구근거GenBank중등록적T.equi 18SrRNA보수서렬설계일대특이성인물화TaqMan탐침,경과반응체계급조건우화,건립료T.equi형광정량PCR검측방법.결과현시,해방법적령민도가체10고패/μL,비보통PCR령민도고1 000배;해방법가이특이지검측T.equi,대마노파패사충、우파패사충、쌍아파패사충여우배형태륵충적검측균위음성;조내급조간중복시험변이계수균소우3％.대50빈림상양품진행검측,형광정량PCR적양성검출솔위40％,상규PCR적양성검출솔부위34％.해검측방법적건립위T.equi적류행병학조사화실험연구제공료일충민감특이적정량검측방법.
