动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
7期
38-43
,共6页
梁盈%梁瑞%张永安%祁克宗%涂健%彭开松
樑盈%樑瑞%張永安%祁剋宗%塗健%彭開鬆
량영%량서%장영안%기극종%도건%팽개송
罗非鱼hepcidin%酵母表达%斑点-酶联免疫吸附试验%抑菌活性%淋巴细胞增殖
囉非魚hepcidin%酵母錶達%斑點-酶聯免疫吸附試驗%抑菌活性%淋巴細胞增殖
라비어hepcidin%효모표체%반점-매련면역흡부시험%억균활성%림파세포증식
为获得重组酵母分泌表达的莫桑比克罗非鱼hepcidin并进行其功能研究,将罗非鱼hepcidin 1-5(TH1-5)成熟肽cDNA插入表达载体pPIC9K,获得重组分泌表达质粒pPIC9K-TH1-5,电转化毕赤酵母GS115,阳性克隆经甲醇诱导获得表达上清;表达上清冻干品经Dot-ELISA检测,并分析了表达产物对指示菌和鸡外周血淋巴细胞的影响.结果表明,TH1-5成熟肽可通过表达质粒pPIC9K在毕赤酵母中实现分泌型表达,Dot-ELISA检测表达上清中含有TH1-5.重组表达的TH1-5对大肠埃希菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、粪肠球菌(ATCC29212)具有明显的抑菌活性;含重组表达TH1-5的上清冻干品(6.25 mg/mL)可协同ConA(0.125 μg/mL)或LPS(0.125 μg/mL)促进鸡外周血淋巴细胞的增殖.
為穫得重組酵母分泌錶達的莫桑比剋囉非魚hepcidin併進行其功能研究,將囉非魚hepcidin 1-5(TH1-5)成熟肽cDNA插入錶達載體pPIC9K,穫得重組分泌錶達質粒pPIC9K-TH1-5,電轉化畢赤酵母GS115,暘性剋隆經甲醇誘導穫得錶達上清;錶達上清凍榦品經Dot-ELISA檢測,併分析瞭錶達產物對指示菌和鷄外週血淋巴細胞的影響.結果錶明,TH1-5成熟肽可通過錶達質粒pPIC9K在畢赤酵母中實現分泌型錶達,Dot-ELISA檢測錶達上清中含有TH1-5.重組錶達的TH1-5對大腸埃希菌(CMCC44102)、金黃色葡萄毬菌(ATCC25923)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、糞腸毬菌(ATCC29212)具有明顯的抑菌活性;含重組錶達TH1-5的上清凍榦品(6.25 mg/mL)可協同ConA(0.125 μg/mL)或LPS(0.125 μg/mL)促進鷄外週血淋巴細胞的增殖.
위획득중조효모분비표체적막상비극라비어hepcidin병진행기공능연구,장라비어hepcidin 1-5(TH1-5)성숙태cDNA삽입표체재체pPIC9K,획득중조분비표체질립pPIC9K-TH1-5,전전화필적효모GS115,양성극륭경갑순유도획득표체상청;표체상청동간품경Dot-ELISA검측,병분석료표체산물대지시균화계외주혈림파세포적영향.결과표명,TH1-5성숙태가통과표체질립pPIC9K재필적효모중실현분비형표체,Dot-ELISA검측표체상청중함유TH1-5.중조표체적TH1-5대대장애희균(CMCC44102)、금황색포도구균(ATCC25923)、동록가단포균(ATCC27853)、분장구균(ATCC29212)구유명현적억균활성;함중조표체TH1-5적상청동간품(6.25 mg/mL)가협동ConA(0.125 μg/mL)혹LPS(0.125 μg/mL)촉진계외주혈림파세포적증식.
