动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
7期
1-6
,共6页
陈淑华%库旭钢%闫贵伟%丁振江%何启盖
陳淑華%庫旭鋼%閆貴偉%丁振江%何啟蓋
진숙화%고욱강%염귀위%정진강%하계개
猪轮状病毒%内衣壳蛋白%间接ELISA
豬輪狀病毒%內衣殼蛋白%間接ELISA
저륜상병독%내의각단백%간접ELISA
为建立猪A群轮状病毒抗体间接ELISA检测方法,用于开展对该病毒感染的流行病学调查和免疫抗体评估,进行了猪A群轮状病毒TM-a株内衣壳VP6基因的表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定分析.目的蛋白得到表达,大小约70 ku,Western blot表明,该蛋白与猪A群轮状病毒阳性血清反应.用该蛋白作为包被抗原,通过对条件优化,包被抗原浓度为2 μg/mL,待检血清稀释倍数为1∶40倍,标记抗体的稀释倍数为1∶4 000倍,建立了检测猪轮状病毒血清IgG抗体的间接ELISA方法.用该方法检测临床样品142份,并与间接免疫荧光试验(IFA)对比,结果显示,两者阳性符合率为94.6％,阴性符合率为83.4％,总符合率为91.5％,表明该方法有效可行.用建立的方法检测临床上不同年龄阶段的猪血清639份,分析其临床感染情况.结果证明该方法可用于猪轮状病毒流行病学调查、猪群抗体水平评估.
為建立豬A群輪狀病毒抗體間接ELISA檢測方法,用于開展對該病毒感染的流行病學調查和免疫抗體評估,進行瞭豬A群輪狀病毒TM-a株內衣殼VP6基因的錶達,用SDS-PAGE和Western blot鑒定分析.目的蛋白得到錶達,大小約70 ku,Western blot錶明,該蛋白與豬A群輪狀病毒暘性血清反應.用該蛋白作為包被抗原,通過對條件優化,包被抗原濃度為2 μg/mL,待檢血清稀釋倍數為1∶40倍,標記抗體的稀釋倍數為1∶4 000倍,建立瞭檢測豬輪狀病毒血清IgG抗體的間接ELISA方法.用該方法檢測臨床樣品142份,併與間接免疫熒光試驗(IFA)對比,結果顯示,兩者暘性符閤率為94.6％,陰性符閤率為83.4％,總符閤率為91.5％,錶明該方法有效可行.用建立的方法檢測臨床上不同年齡階段的豬血清639份,分析其臨床感染情況.結果證明該方法可用于豬輪狀病毒流行病學調查、豬群抗體水平評估.
위건립저A군륜상병독항체간접ELISA검측방법,용우개전대해병독감염적류행병학조사화면역항체평고,진행료저A군륜상병독TM-a주내의각VP6기인적표체,용SDS-PAGE화Western blot감정분석.목적단백득도표체,대소약70 ku,Western blot표명,해단백여저A군륜상병독양성혈청반응.용해단백작위포피항원,통과대조건우화,포피항원농도위2 μg/mL,대검혈청희석배수위1∶40배,표기항체적희석배수위1∶4 000배,건립료검측저륜상병독혈청IgG항체적간접ELISA방법.용해방법검측림상양품142빈,병여간접면역형광시험(IFA)대비,결과현시,량자양성부합솔위94.6％,음성부합솔위83.4％,총부합솔위91.5％,표명해방법유효가행.용건립적방법검측림상상불동년령계단적저혈청639빈,분석기림상감염정황.결과증명해방법가용우저륜상병독류행병학조사、저군항체수평평고.
