山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2014年
7期
584-587
,共4页
甘丙肽%小鼠%转基因%过表达
甘丙肽%小鼠%轉基因%過錶達
감병태%소서%전기인%과표체
galanin%mice%transgenic%overexpression
目的 建立甘丙肽(galanin,GAL)过表达转基因小鼠,为后续研究甘丙肽基因功能提供动物模型. 方法 重组质粒PDGFβ-GAL经XbaⅠ、HindⅢ双酶切后,将连接有启动子的甘丙肽基因片段回收纯化,用显微注射法将甘丙肽基因注入400枚受精卵的雄原核中,选取发育正常的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管壶腹部,待其产仔.用PCR方法鉴定子代小鼠基因型,蛋白印迹分析(Western blot)鉴定子代小鼠体内GAL蛋白表达情况. 结果 获得子代小鼠50只,有8只小鼠在基因组上整合有GAL基因,整合率为16％:Western blot显示转入的基因片段PDGF β-GAL在脑组织中的表达水平比肝组织高.结论 通过显微注射法成功建立了GAL过表达转基因小鼠模型.
目的 建立甘丙肽(galanin,GAL)過錶達轉基因小鼠,為後續研究甘丙肽基因功能提供動物模型. 方法 重組質粒PDGFβ-GAL經XbaⅠ、HindⅢ雙酶切後,將連接有啟動子的甘丙肽基因片段迴收純化,用顯微註射法將甘丙肽基因註入400枚受精卵的雄原覈中,選取髮育正常的受精卵移植到假孕母鼠的輸卵管壺腹部,待其產仔.用PCR方法鑒定子代小鼠基因型,蛋白印跡分析(Western blot)鑒定子代小鼠體內GAL蛋白錶達情況. 結果 穫得子代小鼠50隻,有8隻小鼠在基因組上整閤有GAL基因,整閤率為16％:Western blot顯示轉入的基因片段PDGF β-GAL在腦組織中的錶達水平比肝組織高.結論 通過顯微註射法成功建立瞭GAL過錶達轉基因小鼠模型.
목적 건립감병태(galanin,GAL)과표체전기인소서,위후속연구감병태기인공능제공동물모형. 방법 중조질립PDGFβ-GAL경XbaⅠ、HindⅢ쌍매절후,장련접유계동자적감병태기인편단회수순화,용현미주사법장감병태기인주입400매수정란적웅원핵중,선취발육정상적수정란이식도가잉모서적수란관호복부,대기산자.용PCR방법감정자대소서기인형,단백인적분석(Western blot)감정자대소서체내GAL단백표체정황. 결과 획득자대소서50지,유8지소서재기인조상정합유GAL기인,정합솔위16％:Western blot현시전입적기인편단PDGF β-GAL재뇌조직중적표체수평비간조직고.결론 통과현미주사법성공건립료GAL과표체전기인소서모형.
