作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2014年
7期
1174-1181
,共8页
酵母单杂交%C2H2锌指蛋白%Bj26基因%真菌诱导%瞬时表达%实时荧光定量PCR
酵母單雜交%C2H2鋅指蛋白%Bj26基因%真菌誘導%瞬時錶達%實時熒光定量PCR
효모단잡교%C2H2자지단백%Bj26기인%진균유도%순시표체%실시형광정량PCR
Yeast One-Hybrid System%C2H2-type zinc finger protein%Bj26%Fungal-induction%Transient gene expression%qRT-PCR
锌指蛋白是一类重要的转录因子家族,参与植物基因转录调节、发育及胁迫反应等生理过程.我们前期研究发现芥菜诱导型启动子BjC-P的W-box-like-4为其真菌诱导的核心元件,本研究通过酵母单杂交技术从芥菜cDNA文库中筛选到与W-box-like-4序列特异互作的转录因子基因Bj26.生物信息学分析表明,Bj26含735 bp的开放阅读框,编码一个新的C2H2型锌指蛋白,包括2个典型的C2H2型锌指结构及2个植物特有的QALGGH氨基酸保守序列,等电点pI为9.2,分子量为26.6 kD.亚细胞定位显示该蛋白位于细胞核.本氏烟瞬时表达分析表明Bj26蛋白通过与BjC-P的真菌诱导核心元件序列特异互作,激活启动子BjC-P.实时荧光定量PCR结果显示j26在真菌诱导下表达量明显增高.Bj26的CDS序列与拟南芥和水稻中的C2H2型锌指蛋白序列比对及进化树分析表明,Bj26与拟南芥的C2H2型蛋白同源性高于水稻.以上结果揭示Bj26蛋白可能介导BjC-P真菌诱导响应并参与植物抗真菌病原菌的调控过程.
鋅指蛋白是一類重要的轉錄因子傢族,參與植物基因轉錄調節、髮育及脅迫反應等生理過程.我們前期研究髮現芥菜誘導型啟動子BjC-P的W-box-like-4為其真菌誘導的覈心元件,本研究通過酵母單雜交技術從芥菜cDNA文庫中篩選到與W-box-like-4序列特異互作的轉錄因子基因Bj26.生物信息學分析錶明,Bj26含735 bp的開放閱讀框,編碼一箇新的C2H2型鋅指蛋白,包括2箇典型的C2H2型鋅指結構及2箇植物特有的QALGGH氨基痠保守序列,等電點pI為9.2,分子量為26.6 kD.亞細胞定位顯示該蛋白位于細胞覈.本氏煙瞬時錶達分析錶明Bj26蛋白通過與BjC-P的真菌誘導覈心元件序列特異互作,激活啟動子BjC-P.實時熒光定量PCR結果顯示j26在真菌誘導下錶達量明顯增高.Bj26的CDS序列與擬南芥和水稻中的C2H2型鋅指蛋白序列比對及進化樹分析錶明,Bj26與擬南芥的C2H2型蛋白同源性高于水稻.以上結果揭示Bj26蛋白可能介導BjC-P真菌誘導響應併參與植物抗真菌病原菌的調控過程.
자지단백시일류중요적전록인자가족,삼여식물기인전록조절、발육급협박반응등생리과정.아문전기연구발현개채유도형계동자BjC-P적W-box-like-4위기진균유도적핵심원건,본연구통과효모단잡교기술종개채cDNA문고중사선도여W-box-like-4서렬특이호작적전록인자기인Bj26.생물신식학분석표명,Bj26함735 bp적개방열독광,편마일개신적C2H2형자지단백,포괄2개전형적C2H2형자지결구급2개식물특유적QALGGH안기산보수서렬,등전점pI위9.2,분자량위26.6 kD.아세포정위현시해단백위우세포핵.본씨연순시표체분석표명Bj26단백통과여BjC-P적진균유도핵심원건서렬특이호작,격활계동자BjC-P.실시형광정량PCR결과현시j26재진균유도하표체량명현증고.Bj26적CDS서렬여의남개화수도중적C2H2형자지단백서렬비대급진화수분석표명,Bj26여의남개적C2H2형단백동원성고우수도.이상결과게시Bj26단백가능개도BjC-P진균유도향응병삼여식물항진균병원균적조공과정.