中国血管外科杂志（电子版）
中國血管外科雜誌（電子版）
중국혈관외과잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF VASCULAR SURGERY(ELECTRONIC VERSION)
2014年
2期
88-92
,共5页
刘坤%罗军%王洋%李新喜%白超
劉坤%囉軍%王洋%李新喜%白超
류곤%라군%왕양%리신희%백초
骨髓基质细胞%原位杂交%细胞培养%肢体缺血
骨髓基質細胞%原位雜交%細胞培養%肢體缺血
골수기질세포%원위잡교%세포배양%지체결혈
目的 探讨同种异体骨髓基质细胞(MSCs)移植对SD大鼠缺血肢体治疗机制和规律,为MSCs移植治疗肢体缺血提供理论基础.方法 体外全骨髓培养法培养雄性SD大鼠MSCs至三代.60只SD大鼠经结扎腹主动脉及双侧腹壁阴部动脉造成双下肢缺血模型,随机分为对照组(n=30)及移植组(n=30),造模后3天度过反应期后移植组右下肢腓肠肌及股二头肌内分5点注射移植含1×106个MSCs细胞悬液0.5ml,对照组同法注射生理盐水0.5ml.按移植后1周、2周、4周、6周、8周时两组再随机分为5个亚组(n=6),分别取动物麻醉后穿刺双侧髂静脉血行血氧分压测定,处死动物取左前肢,左后、右后肢骨骼肌标本4％多聚甲醛固定,制切片.行Y染色体性别决定区(SRY)原位杂交,血管内皮生长因子(VEGF)-mRNA原位杂交、HE染色,计数VEGF-mRNA阳性细胞数和毛细血管数.对照组仅作右后肢的相关检测.结果 SRY:移植组右后肢、左后肢、骨骼肌间间隙内有阳性细胞构成血管样结构,有的在血管周围,未见到呈阳性的骨骼肌细胞.左前肢的骨骼肌周围筋膜内偶尔可见到阳性细胞.对照组无阳性细胞发现.VEGF-mRNA原位杂交:对照组和移植组右后肢、左后肢VEGF-mRNA呈进行性升高(P＜0.001),而左前肢则无明显升高(P=0.694).在第1周时对照组与移植组相比无统计学差异(P=0.079),随后移植组明显高于对照组(P＜0.001).静脉血氧分压:对照组及移植组髂静脉血氧分压呈进行性升高(P＜0.001),移植组右后肢髂静脉氧分压较左后肢及对照组明显高(P＜0.05).毛细血管计数:对照组及移植组右后肢、左后肢的毛细血管计数呈进行性增高(P＜0.05),而左前肢则无统计学意义(P=0.055),移植组中右后肢毛细血管计数明显高于左后肢及对照组(P＜0.05).HE染色:未见明显组织细胞核异常分裂改变.结论 移植的MSCs可以在同种异体动物体内长期生存、分化,促进缺血肢体的VEGF-mRNA的表达和毛细血管的成长.
目的 探討同種異體骨髓基質細胞(MSCs)移植對SD大鼠缺血肢體治療機製和規律,為MSCs移植治療肢體缺血提供理論基礎.方法 體外全骨髓培養法培養雄性SD大鼠MSCs至三代.60隻SD大鼠經結扎腹主動脈及雙側腹壁陰部動脈造成雙下肢缺血模型,隨機分為對照組(n=30)及移植組(n=30),造模後3天度過反應期後移植組右下肢腓腸肌及股二頭肌內分5點註射移植含1×106箇MSCs細胞懸液0.5ml,對照組同法註射生理鹽水0.5ml.按移植後1週、2週、4週、6週、8週時兩組再隨機分為5箇亞組(n=6),分彆取動物痳醉後穿刺雙側髂靜脈血行血氧分壓測定,處死動物取左前肢,左後、右後肢骨骼肌標本4％多聚甲醛固定,製切片.行Y染色體性彆決定區(SRY)原位雜交,血管內皮生長因子(VEGF)-mRNA原位雜交、HE染色,計數VEGF-mRNA暘性細胞數和毛細血管數.對照組僅作右後肢的相關檢測.結果 SRY:移植組右後肢、左後肢、骨骼肌間間隙內有暘性細胞構成血管樣結構,有的在血管週圍,未見到呈暘性的骨骼肌細胞.左前肢的骨骼肌週圍觔膜內偶爾可見到暘性細胞.對照組無暘性細胞髮現.VEGF-mRNA原位雜交:對照組和移植組右後肢、左後肢VEGF-mRNA呈進行性升高(P＜0.001),而左前肢則無明顯升高(P=0.694).在第1週時對照組與移植組相比無統計學差異(P=0.079),隨後移植組明顯高于對照組(P＜0.001).靜脈血氧分壓:對照組及移植組髂靜脈血氧分壓呈進行性升高(P＜0.001),移植組右後肢髂靜脈氧分壓較左後肢及對照組明顯高(P＜0.05).毛細血管計數:對照組及移植組右後肢、左後肢的毛細血管計數呈進行性增高(P＜0.05),而左前肢則無統計學意義(P=0.055),移植組中右後肢毛細血管計數明顯高于左後肢及對照組(P＜0.05).HE染色:未見明顯組織細胞覈異常分裂改變.結論 移植的MSCs可以在同種異體動物體內長期生存、分化,促進缺血肢體的VEGF-mRNA的錶達和毛細血管的成長.
목적 탐토동충이체골수기질세포(MSCs)이식대SD대서결혈지체치료궤제화규률,위MSCs이식치료지체결혈제공이론기출.방법 체외전골수배양법배양웅성SD대서MSCs지삼대.60지SD대서경결찰복주동맥급쌍측복벽음부동맥조성쌍하지결혈모형,수궤분위대조조(n=30)급이식조(n=30),조모후3천도과반응기후이식조우하지비장기급고이두기내분5점주사이식함1×106개MSCs세포현액0.5ml,대조조동법주사생리염수0.5ml.안이식후1주、2주、4주、6주、8주시량조재수궤분위5개아조(n=6),분별취동물마취후천자쌍측가정맥혈행혈양분압측정,처사동물취좌전지,좌후、우후지골격기표본4％다취갑철고정,제절편.행Y염색체성별결정구(SRY)원위잡교,혈관내피생장인자(VEGF)-mRNA원위잡교、HE염색,계수VEGF-mRNA양성세포수화모세혈관수.대조조부작우후지적상관검측.결과 SRY:이식조우후지、좌후지、골격기간간극내유양성세포구성혈관양결구,유적재혈관주위,미견도정양성적골격기세포.좌전지적골격기주위근막내우이가견도양성세포.대조조무양성세포발현.VEGF-mRNA원위잡교:대조조화이식조우후지、좌후지VEGF-mRNA정진행성승고(P＜0.001),이좌전지칙무명현승고(P=0.694).재제1주시대조조여이식조상비무통계학차이(P=0.079),수후이식조명현고우대조조(P＜0.001).정맥혈양분압:대조조급이식조가정맥혈양분압정진행성승고(P＜0.001),이식조우후지가정맥양분압교좌후지급대조조명현고(P＜0.05).모세혈관계수:대조조급이식조우후지、좌후지적모세혈관계수정진행성증고(P＜0.05),이좌전지칙무통계학의의(P=0.055),이식조중우후지모세혈관계수명현고우좌후지급대조조(P＜0.05).HE염색:미견명현조직세포핵이상분렬개변.결론 이식적MSCs가이재동충이체동물체내장기생존、분화,촉진결혈지체적VEGF-mRNA적표체화모세혈관적성장.
