CAJ | 학술논문

以吉富罗非鱼YY超雄鱼和XY雄鱼的血液为试验材料,采用抑制性消减杂交技术(SSH)构建YY超雄罗非鱼和XY雄鱼的消减文库.采用PCR方法评价文库的质量后,通过DNA测序技术对204个克隆进行测序,经手动去除载体和引物序列后获得86条Contig,应用BLASTX和BioGPS程序对所获Contigs进行生物信息学分析.成功构建了吉富罗非鱼YY超雄鱼和XY雄鱼消减文库,文库库容量(CFU)为3860,库重组率为95％,所获得的DNA片段集中分布在400～ 650 bp之间.获得31条罗非鱼序列,19条非罗非鱼序列,36条序列未发现同源蛋白,可能为YY罗非鱼的新基因.对罗非鱼种属的25条差异序列进行BioGPS功能分类分析发现这些序列参与12个生物过程,可将其分为至少8个不同的分子功能群.所获序列中编码磷酸甘油酰基转移酶-4样蛋白和N-(-乙酰转移酶-10 X2同种型的基因可能与罗非鱼的性发生发育相关.进一步分析发现血红蛋白、促红细胞生成素受体样蛋白、热休克蛋白、谷光氨肽样蛋白和锌指蛋白Gfi-1B样蛋白可能在YY超雄罗非鱼抗环境温度和应激方面发挥重要作用.所构建的吉富罗非鱼YY超雄鱼和XY雄鱼消减文库质量较高,适合YY超雄罗非鱼与XY雄鱼差异基因的筛选,为今后开发YY超雄罗非鱼性别鉴定方法奠定了坚实基础.
이길부라비어YY초웅어화XY웅어적혈액위시험재료,채용억제성소감잡교기술(SSH)구건YY초웅라비어화XY웅어적소감문고.채용PCR방법평개문고적질량후,통과DNA측서기술대204개극륭진행측서,경수동거제재체화인물서렬후획득86조Contig,응용BLASTX화BioGPS정서대소획Contigs진행생물신식학분석.성공구건료길부라비어YY초웅어화XY웅어소감문고,문고고용량(CFU)위3860,고중조솔위95％,소획득적DNA편단집중분포재400～ 650 bp지간.획득31조라비어서렬,19조비라비어서렬,36조서렬미발현동원단백,가능위YY라비어적신기인.대라비어충속적25조차이서렬진행BioGPS공능분류분석발현저사서렬삼여12개생물과정,가장기분위지소8개불동적분자공능군.소획서렬중편마린산감유선기전이매-4양단백화N-(-을선전이매-10 X2동충형적기인가능여라비어적성발생발육상관.진일보분석발현혈홍단백、촉홍세포생성소수체양단백、열휴극단백、곡광안태양단백화자지단백Gfi-1B양단백가능재YY초웅라비어항배경온도화응격방면발휘중요작용.소구건적길부라비어YY초웅어화XY웅어소감문고질량교고,괄합YY초웅라비어여XY웅어차이기인적사선,위금후개발YY초웅라비어성별감정방법전정료견실기출.