湖泊科学
湖泊科學
호박과학
JOURNAL OF LAKE SCIENCES
2014年
4期
632-636
,共5页
徐磊%李思嘉%王晟%韩小玉%韩博平
徐磊%李思嘉%王晟%韓小玉%韓博平
서뢰%리사가%왕성%한소옥%한박평
休眠卵%DNA提取%盔型溞%氯仿异戊醇提取法%玻璃乳提取法
休眠卵%DNA提取%盔型溞%氯倣異戊醇提取法%玻璃乳提取法
휴면란%DNA제취%회형소%록방이무순제취법%파리유제취법
Resting eggs%DNA extraction%Daphnia galeata%Ultra-Sep Beads method%chloroform isoamyl alcohol method
休眠卵是枝角类在环境胁迫条件下通过有性生殖形成的,休眠卵的孵化对种群补充与恢复有着重要作用.沉积于底泥中的休眠卵保存了不同阶段的种群遗传信息,有效地提取枝角类休眠卵基因组DNA是进一步研究水体枝角类遗传多样性的关键环节.采用目前国际上使用的氯仿异戊醇提取法和玻璃乳提取法分别对流溪河水库底泥中表层和底层的盔型潘(Daphnia galeata)休眠卵进行基因组DNA提取的比较分析.结果显示,氯仿异戊醇提取法成功率为27.5％,平均浓度为14.25±1.84 ng/μl;玻璃乳提取法成功率为65.0％,平均浓度为28.37±2.56 ng/μl.无论是提取成功率还是提取浓度玻璃乳提取法都显著高于氯仿异戊醇提取法,且玻璃乳提取法所用试剂少,不涉及有毒试剂,操作步骤简单,整个提取过程所用时间短,玻璃乳提取法提取枝角类休眠卵基因组DNA是一种快捷实用的方法.
休眠卵是枝角類在環境脅迫條件下通過有性生殖形成的,休眠卵的孵化對種群補充與恢複有著重要作用.沉積于底泥中的休眠卵保存瞭不同階段的種群遺傳信息,有效地提取枝角類休眠卵基因組DNA是進一步研究水體枝角類遺傳多樣性的關鍵環節.採用目前國際上使用的氯倣異戊醇提取法和玻璃乳提取法分彆對流溪河水庫底泥中錶層和底層的盔型潘(Daphnia galeata)休眠卵進行基因組DNA提取的比較分析.結果顯示,氯倣異戊醇提取法成功率為27.5％,平均濃度為14.25±1.84 ng/μl;玻璃乳提取法成功率為65.0％,平均濃度為28.37±2.56 ng/μl.無論是提取成功率還是提取濃度玻璃乳提取法都顯著高于氯倣異戊醇提取法,且玻璃乳提取法所用試劑少,不涉及有毒試劑,操作步驟簡單,整箇提取過程所用時間短,玻璃乳提取法提取枝角類休眠卵基因組DNA是一種快捷實用的方法.
휴면란시지각류재배경협박조건하통과유성생식형성적,휴면란적부화대충군보충여회복유착중요작용.침적우저니중적휴면란보존료불동계단적충군유전신식,유효지제취지각류휴면란기인조DNA시진일보연구수체지각류유전다양성적관건배절.채용목전국제상사용적록방이무순제취법화파리유제취법분별대류계하수고저니중표층화저층적회형반(Daphnia galeata)휴면란진행기인조DNA제취적비교분석.결과현시,록방이무순제취법성공솔위27.5％,평균농도위14.25±1.84 ng/μl;파리유제취법성공솔위65.0％,평균농도위28.37±2.56 ng/μl.무론시제취성공솔환시제취농도파리유제취법도현저고우록방이무순제취법,차파리유제취법소용시제소,불섭급유독시제,조작보취간단,정개제취과정소용시간단,파리유제취법제취지각류휴면란기인조DNA시일충쾌첩실용적방법.
