四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2014年
4期
829-834
,共6页
杨硕%李小姣%武志强%刘瑞熙%刘兰军%杨志荣
楊碩%李小姣%武誌彊%劉瑞熙%劉蘭軍%楊誌榮
양석%리소교%무지강%류서희%류란군%양지영
狂犬病病毒%基质蛋白%杆状病毒表达系统%重组杆状病毒%Sf9昆虫细胞
狂犬病病毒%基質蛋白%桿狀病毒錶達繫統%重組桿狀病毒%Sf9昆蟲細胞
광견병병독%기질단백%간상병독표체계통%중조간상병독%Sf9곤충세포
Rabies virus%Matrix protein%Baculovirus expression system%Reconstitued baculovirus%SF9 insect cell-line
本文设计并合成了狂犬病病毒PV株基质蛋白(matrixprotein,MP)基因与优化的PV株基质蛋白基因,分别克隆至转移载体pVL1393中构建穿梭质粒,再以穿梭质粒与线性化的杆状病毒BaculoGoldTM进行重组,构建表达MP的重组杆状病毒,然后感染Sf9昆虫细胞进行表达.通过SDS PAGE电泳分析显示,表达的MP和优化后MP约分别为27kDa和26kDa.间接免疫荧光检测(IFA)显示,表达的MP和优化后MP均可与鼠抗His单克隆抗体及鼠抗RV血清特异性结合,出现明显的特异性绿色荧光.Western blot检测显示,表达的MP和优化后MP均可被鼠抗His单克隆抗体特异性识别.
本文設計併閤成瞭狂犬病病毒PV株基質蛋白(matrixprotein,MP)基因與優化的PV株基質蛋白基因,分彆剋隆至轉移載體pVL1393中構建穿梭質粒,再以穿梭質粒與線性化的桿狀病毒BaculoGoldTM進行重組,構建錶達MP的重組桿狀病毒,然後感染Sf9昆蟲細胞進行錶達.通過SDS PAGE電泳分析顯示,錶達的MP和優化後MP約分彆為27kDa和26kDa.間接免疫熒光檢測(IFA)顯示,錶達的MP和優化後MP均可與鼠抗His單剋隆抗體及鼠抗RV血清特異性結閤,齣現明顯的特異性綠色熒光.Western blot檢測顯示,錶達的MP和優化後MP均可被鼠抗His單剋隆抗體特異性識彆.
본문설계병합성료광견병병독PV주기질단백(matrixprotein,MP)기인여우화적PV주기질단백기인,분별극륭지전이재체pVL1393중구건천사질립,재이천사질립여선성화적간상병독BaculoGoldTM진행중조,구건표체MP적중조간상병독,연후감염Sf9곤충세포진행표체.통과SDS PAGE전영분석현시,표체적MP화우화후MP약분별위27kDa화26kDa.간접면역형광검측(IFA)현시,표체적MP화우화후MP균가여서항His단극륭항체급서항RV혈청특이성결합,출현명현적특이성록색형광.Western blot검측현시,표체적MP화우화후MP균가피서항His단극륭항체특이성식별.
