中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
6期
69-72
,共4页
臧京帅%高志强%张乐萃%张鹤晓
臧京帥%高誌彊%張樂萃%張鶴曉
장경수%고지강%장악췌%장학효
水疱性口炎病毒%G蛋白基因%重组表达%间接ELISA
水皰性口炎病毒%G蛋白基因%重組錶達%間接ELISA
수포성구염병독%G단백기인%중조표체%간접ELISA
根据水疱性口炎病毒印第安那型(IND型)和新泽西型(NJ型)G蛋白抗原表位分布图,在表达抗原表位较密集的基因区域设计引物,采用RT-PCR方法分别扩增水泡性口炎病毒IND型657 bp G蛋白基因片段和NJ型666 bp G蛋白基因片段,并将其克隆到pET-32a表达载体.将重组质粒转化宿主菌Rosetta,经1.0 mmol/L IPTG诱导,外源基因获高效表达.通过Western-blot以及ELISA试验证明截短表达的2个血清型的重组G蛋白与标准阳性血清发生反应.将2个血清型的重组G蛋白等量混合作为检测抗原包被酶标板,建立了可检测IND型和NJ型水泡性口炎病毒抗体的间接ELISA方法.
根據水皰性口炎病毒印第安那型(IND型)和新澤西型(NJ型)G蛋白抗原錶位分佈圖,在錶達抗原錶位較密集的基因區域設計引物,採用RT-PCR方法分彆擴增水泡性口炎病毒IND型657 bp G蛋白基因片段和NJ型666 bp G蛋白基因片段,併將其剋隆到pET-32a錶達載體.將重組質粒轉化宿主菌Rosetta,經1.0 mmol/L IPTG誘導,外源基因穫高效錶達.通過Western-blot以及ELISA試驗證明截短錶達的2箇血清型的重組G蛋白與標準暘性血清髮生反應.將2箇血清型的重組G蛋白等量混閤作為檢測抗原包被酶標闆,建立瞭可檢測IND型和NJ型水泡性口炎病毒抗體的間接ELISA方法.
근거수포성구염병독인제안나형(IND형)화신택서형(NJ형)G단백항원표위분포도,재표체항원표위교밀집적기인구역설계인물,채용RT-PCR방법분별확증수포성구염병독IND형657 bp G단백기인편단화NJ형666 bp G단백기인편단,병장기극륭도pET-32a표체재체.장중조질립전화숙주균Rosetta,경1.0 mmol/L IPTG유도,외원기인획고효표체.통과Western-blot이급ELISA시험증명절단표체적2개혈청형적중조G단백여표준양성혈청발생반응.장2개혈청형적중조G단백등량혼합작위검측항원포피매표판,건립료가검측IND형화NJ형수포성구염병독항체적간접ELISA방법.
