江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
7期
50-53
,共4页
张聪子%童巧珍%郭婷%高昱%蔡嘉洛
張聰子%童巧珍%郭婷%高昱%蔡嘉洛
장총자%동교진%곽정%고욱%채가락
蛇莓%RAPD-PCR%ISSR-PCR%单因素%正交设计%体系优化
蛇莓%RAPD-PCR%ISSR-PCR%單因素%正交設計%體繫優化
사매%RAPD-PCR%ISSR-PCR%단인소%정교설계%체계우화
采用单因素试验结合正交试验，对PCR反应体系中的5种主要反应因子Mg2＋、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA浓度进行优化筛选，确立了适合蛇莓基因组DNA的RAPD和ISSR反应体系，RAPD反应体系（20μL）：Mg2＋1．5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶1 U、引物0．2μmol/L、DNA模板60 ng；ISSR反应体系（20μL）：Mg2＋2．0 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶0．5 U、引物1μmol/L、DNA模板60 ng。利用确立的体系对24份蛇莓种质进行扩增，结果条带清晰明亮，多态性好。
採用單因素試驗結閤正交試驗，對PCR反應體繫中的5種主要反應因子Mg2＋、dNTPs、TaqDNA聚閤酶、引物、模闆DNA濃度進行優化篩選，確立瞭適閤蛇莓基因組DNA的RAPD和ISSR反應體繫，RAPD反應體繫（20μL）：Mg2＋1．5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶1 U、引物0．2μmol/L、DNA模闆60 ng；ISSR反應體繫（20μL）：Mg2＋2．0 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶0．5 U、引物1μmol/L、DNA模闆60 ng。利用確立的體繫對24份蛇莓種質進行擴增，結果條帶清晰明亮，多態性好。
채용단인소시험결합정교시험，대PCR반응체계중적5충주요반응인자Mg2＋、dNTPs、TaqDNA취합매、인물、모판DNA농도진행우화사선，학립료괄합사매기인조DNA적RAPD화ISSR반응체계，RAPD반응체계（20μL）：Mg2＋1．5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq매1 U、인물0．2μmol/L、DNA모판60 ng；ISSR반응체계（20μL）：Mg2＋2．0 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq매0．5 U、인물1μmol/L、DNA모판60 ng。이용학립적체계대24빈사매충질진행확증，결과조대청석명량，다태성호。
