江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
7期
46-49
,共4页
王树香%李明%高宝嘉
王樹香%李明%高寶嘉
왕수향%리명%고보가
油松%分子标记%ISSR-PCR%反应体系%正交设计
油鬆%分子標記%ISSR-PCR%反應體繫%正交設計
유송%분자표기%ISSR-PCR%반응체계%정교설계
采用正交设计的方法对油松ISSR-PCR反应体系5因素( Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用SPSS数据软件分析。结果表明:各因素不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,且除dNTP因素外其他4因素影响均较大;筛选出各反应因素的最佳水平,建立油松ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1 U、模板5μg/μL、Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.4μmol/L;进行梯度退火试验,筛选出针对不同引物的最适的油松ISSR退火温度。该优化体系的建立为油松及其近缘种的系统学和种质资源鉴定及遗传多样性的研究奠定基础。
採用正交設計的方法對油鬆ISSR-PCR反應體繫5因素( Taq DNA聚閤酶、Mg2+、模闆DNA、dNTPs、引物的濃度)在4水平上進行優化試驗,PCR結果用SPSS數據軟件分析。結果錶明:各因素不同水平對PCR反應結果都有顯著的影響,且除dNTP因素外其他4因素影響均較大;篩選齣各反應因素的最佳水平,建立油鬆ISSR-PCR的最佳反應體繫(20μL)為:Taq DNA聚閤酶1 U、模闆5μg/μL、Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.4μmol/L;進行梯度退火試驗,篩選齣針對不同引物的最適的油鬆ISSR退火溫度。該優化體繫的建立為油鬆及其近緣種的繫統學和種質資源鑒定及遺傳多樣性的研究奠定基礎。
채용정교설계적방법대유송ISSR-PCR반응체계5인소( Taq DNA취합매、Mg2+、모판DNA、dNTPs、인물적농도)재4수평상진행우화시험,PCR결과용SPSS수거연건분석。결과표명:각인소불동수평대PCR반응결과도유현저적영향,차제dNTP인소외기타4인소영향균교대;사선출각반응인소적최가수평,건립유송ISSR-PCR적최가반응체계(20μL)위:Taq DNA취합매1 U、모판5μg/μL、Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、인물0.4μmol/L;진행제도퇴화시험,사선출침대불동인물적최괄적유송ISSR퇴화온도。해우화체계적건립위유송급기근연충적계통학화충질자원감정급유전다양성적연구전정기출。