CAJ | 학술논문

为了验证查尔酮还原酶基因CHR1在大豆苷元合成中的作用,文章克隆了CHR1基因并构建了RNA干扰表达载体pCPB-CHRl-RNAi,将载体转化受体大豆品种“吉农28”中,以期抑制CHR1基因的转录.通过农杆菌介导的遗传转化和PCR检测得到4株To代阳性植株,13株T1代阳性植株.Southern blotting结果表明,功能元件以单拷贝的形式整合到大豆的基因组中.利用实时荧光定量PCR法(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)测定CHR1基因在mRNA水平上的表达量,结果表明,转基因大豆植株中CHR1的表达量与未转化的受体大豆相比降低了60％～99％;高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)检测到合成大豆苷元过程中的前体物质异甘草素的含量降低了38.7％.该RNA干扰机制在转录水平上抑制了CHR1基因的表达.
위료험증사이동환원매기인CHR1재대두감원합성중적작용,문장극륭료CHR1기인병구건료RNA간우표체재체pCPB-CHRl-RNAi,장재체전화수체대두품충“길농28”중,이기억제CHR1기인적전록.통과농간균개도적유전전화화PCR검측득도4주To대양성식주,13주T1대양성식주.Southern blotting결과표명,공능원건이단고패적형식정합도대두적기인조중.이용실시형광정량PCR법(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)측정CHR1기인재mRNA수평상적표체량,결과표명,전기인대두식주중CHR1적표체량여미전화적수체대두상비강저료60％～99％;고효액상색보법(High performance liquid chromatography,HPLC)검측도합성대두감원과정중적전체물질이감초소적함량강저료38.7％.해RNA간우궤제재전록수평상억제료CHR1기인적표체.