医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2014年
10期
99-103
,共5页
聂刚%亓俊华%姜南雁%徐云升
聶剛%亓俊華%薑南雁%徐雲升
섭강%기준화%강남안%서운승
高浓度葡萄糖%表皮干细胞%增殖
高濃度葡萄糖%錶皮榦細胞%增殖
고농도포도당%표피간세포%증식
High concentration of glucose%Epidermal stem cells%Proliferation
目的 探讨高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞增殖的影响.方法 利用Ⅳ型胶原的快速黏附法分离培养小鼠表皮干细胞,观察其形态学;通过免疫荧光法检测表皮干细胞标志物β1整合素和K19来鉴定表皮干细胞;将小鼠表皮干细胞分别放在葡萄糖浓度为5.6、15和30mmol/L的培养基里培养;MTT法检测细胞增殖情况,免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平.结果 体外培养的小鼠表皮干细胞呈克隆样生长,增殖速度较快,细胞形态呈铺路石样,边缘细胞呈梭形,细胞核质比较大;免疫荧光法检测到培养的小鼠表皮干细胞β1整合素和K19呈阳性表达且阳性表达率均为100％;MTT法检测到与对照组(5.6mmol/L浓度葡萄糖)相比,15mmol/L浓度葡萄糖刺激72h后检测到细胞增殖速度无明显改变,而30mmol/L浓度葡萄糖刺激24、48和72h后检测到细胞增殖速度降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法检测到与对照组相比,30mmol/L浓度葡萄糖刺激48h后凋亡蛋白Bax的蛋白表达量明显增加而抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论 本研究结果表明较高浓度(30mmol/L)葡萄糖可以明显抑制小鼠表皮干细胞的增殖,从干细胞角度进一步为糖尿病创面难愈的原因提供了实验室依据.
目的 探討高濃度葡萄糖對小鼠錶皮榦細胞增殖的影響.方法 利用Ⅳ型膠原的快速黏附法分離培養小鼠錶皮榦細胞,觀察其形態學;通過免疫熒光法檢測錶皮榦細胞標誌物β1整閤素和K19來鑒定錶皮榦細胞;將小鼠錶皮榦細胞分彆放在葡萄糖濃度為5.6、15和30mmol/L的培養基裏培養;MTT法檢測細胞增殖情況,免疫印跡法檢測細胞凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白錶達水平.結果 體外培養的小鼠錶皮榦細胞呈剋隆樣生長,增殖速度較快,細胞形態呈鋪路石樣,邊緣細胞呈梭形,細胞覈質比較大;免疫熒光法檢測到培養的小鼠錶皮榦細胞β1整閤素和K19呈暘性錶達且暘性錶達率均為100％;MTT法檢測到與對照組(5.6mmol/L濃度葡萄糖)相比,15mmol/L濃度葡萄糖刺激72h後檢測到細胞增殖速度無明顯改變,而30mmol/L濃度葡萄糖刺激24、48和72h後檢測到細胞增殖速度降低,差異有統計學意義(P＜0.05).Western blot法檢測到與對照組相比,30mmol/L濃度葡萄糖刺激48h後凋亡蛋白Bax的蛋白錶達量明顯增加而抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白錶達水平明顯降低(P＜0.05).結論 本研究結果錶明較高濃度(30mmol/L)葡萄糖可以明顯抑製小鼠錶皮榦細胞的增殖,從榦細胞角度進一步為糖尿病創麵難愈的原因提供瞭實驗室依據.
목적 탐토고농도포도당대소서표피간세포증식적영향.방법 이용Ⅳ형효원적쾌속점부법분리배양소서표피간세포,관찰기형태학;통과면역형광법검측표피간세포표지물β1정합소화K19래감정표피간세포;장소서표피간세포분별방재포도당농도위5.6、15화30mmol/L적배양기리배양;MTT법검측세포증식정황,면역인적법검측세포조망단백Bax화항조망단백Bcl-2적단백표체수평.결과 체외배양적소서표피간세포정극륭양생장,증식속도교쾌,세포형태정포로석양,변연세포정사형,세포핵질비교대;면역형광법검측도배양적소서표피간세포β1정합소화K19정양성표체차양성표체솔균위100％;MTT법검측도여대조조(5.6mmol/L농도포도당)상비,15mmol/L농도포도당자격72h후검측도세포증식속도무명현개변,이30mmol/L농도포도당자격24、48화72h후검측도세포증식속도강저,차이유통계학의의(P＜0.05).Western blot법검측도여대조조상비,30mmol/L농도포도당자격48h후조망단백Bax적단백표체량명현증가이항조망단백Bcl-2단백표체수평명현강저(P＜0.05).결론 본연구결과표명교고농도(30mmol/L)포도당가이명현억제소서표피간세포적증식,종간세포각도진일보위당뇨병창면난유적원인제공료실험실의거.
